[发明专利]一种苏丹草胚接种转基因技术

权利要求书

1.一种苏丹草胚接种转基因技术包括接种液接种和暗箱培养，其特征在于，以苏丹草种子为载体，进行刺胚接种加接种液反复真空浸泡、充分接种。

2.根据权利要求1所述的转基因技术，其特征在于它包括①制备双元载体接种液、②苏丹草种子消毒、③无菌水浸种、④刺胚接种、⑤接种液抽真空浸种、⑥暗箱培养、⑦育苗栽培7个步骤。

3.根据权利要求2所述的转基因技术，其特征在于所述的制备双元载体接种液的做法是：将已经转入双元载体的农杆菌接种到100mL的YEP液体培养基中培养2天，培养温度为28℃。

4.根据权利要求2所述的转基因技术，其特征在于所述的苏丹草种子消毒的做法是：选取饱满的苏丹草种子先后用乙醇和84消毒液消毒，消毒结束后用灭菌水洗净种子。

5.根据权利要求2所述的转基因技术，其特征在于所述的无菌水浸种的做法是：将种子转入灭菌水中28℃浸泡2-24小时，使种子充分吸胀。

6.根据权利要求2所述的转基因技术，其特征在于所述的刺胚接种的做法是：将吸胀的种子取出置于已灭菌的培养皿中，用已消毒的钢针蘸取OD₆₀₀为0.6的农杆菌接种液扎刺胚芽，深度大约为1mm。

7.根据权利要求2所述的转基因技术，其特征在于所述的接种液抽真空浸种的做法是：将刺完的种子放在含有200μmol/L乙酰丁香酮的农杆菌接种液中抽真空到-0.1MPa浸种30min，恢复常压后再抽真空到-0.1MPa浸种5min。

8.根据权利要求2所述的转基因技术，其特征在于所述的暗箱培养的做法是：将种子置于发芽盒中，22℃恒温培养箱暗湿润培养4天。

9.根据权利要求2所述的转基因技术，其特征在于所述的育苗和鉴定的做法是：将培养后的种子单粒播到营养钵中，置于合适的温度生长，在出现3片叶时即可进行转基因植株的鉴定。