[发明专利]一种从甜菊糖中制备莱鲍迪甙C的方法

说明书

技术领域

本发明属于医药食品技术领域，涉及一种从甜菊糖中分离莱鲍迪甙C（Rebaudioside C）的制备方法，具体涉及的是应用轴向高压制备色谱技术制备莱鲍迪甙C的方法。

背景技术

甜菊糖中的甜味成分均属糖甙类。甙亦称苷或配糖体杂糖体，是糖或糖的衍生物与另一非糖化合物，通过糖的端基碳原子连接缩合而成的化合物。苷水解后能生成糖和非糖两部分，其非糖部分称为苷元或配基，配糖基(agly-cone，genin)，国外研究先后从甜菊叶提取物中分离出8种不同甜味成分：即甜菊糖苷(stevioside)；莱鲍迪甙(renaudiside)A、B、C、D、E；杜尔可苷(dulcoside)A、B，这8种成分是以相同的双萜配基构成的配糖体，属于四环双萜类化合物，它们在C-4位的α-羧基上连接一个葡萄糖，其次C-13位上连接有二糖或三糖。其中以在C-13上连接一个槐糖的甜菊糖苷(Stevioside简称Stv)和C-13上槐糖分子上又连一个葡萄糖分子的莱包迪甙A (RebaudiosideA 简称RebA )为主要。现已确定的甜菊甜味成分有6种：即甜菊苷；莱鲍迪苷A、D、C、E；杜尔可甙A。它们均属甙类化合物，具有相同甙元——甜菊醇(steviol)。它们之间的区别在于甙键上结合糖的种类数量和构成型式不同。甜叶菊糖不但对人体没有任何不良影响，相反，它还有降血压、强壮身体、治糖尿病等药用价值，它不但夺得了“甜味世界”的冠军，还被称作“时髦的甜味品”。其中瑞鲍迪甙A甜度最高口感最接近蔗糖，甜菊甙具有甜菊甙产品特有的甜味和清凉感，其他成分不仅甜度较低，而且还带有不同程度的苦涩味，虽然含量不高，但对产品的品质影响较大，特别是瑞鲍迪甙C苦涩味较重，严重影响了甜菊糖甙产品的口感和品质，成为生产厂家千方百计想要出去的成分。但是，正是这种具有苦涩味的物质蕴含着很多不为人知的潜在功效，成为科研开发的一个新方向，因其具有抗肿瘤、降血压、降血脂、减肥等功效，在日本被制成药品在临床上进行应用。我国作为一个甜菊甙产品的生产和出口大国，科研开发部门也在时刻关注瑞鲍迪苷C的发展动向，因其潜在的经济价值，国内外众多生产厂家也把目光聚焦到该产品上来，成为甜菊糖甙产品深加工的又一个新方向。

目前甜菊糖的生产厂家大多数都采用结晶的方法来获得高纯度的STV及RA，经美国学者研究发现，莱鲍迪甙C可以作为甜味增强剂进行应用并能显著降低蔗糖的使用量，作为替代糖源的莱鲍迪甙C越来越受到人们的关注。

莱鲍迪甙C的作用机理我们还无法研究清楚，关键是市场上高纯度的莱鲍迪甙C来源比较少，主要是以莱鲍迪甙A及甜菊糖甙为主的原料，因此获得高纯度莱鲍迪甙C（Rebaudioside C）是当前急待解决的课题，而提高莱鲍迪甙C的纯度技术上有很大难度，现有技术中制备方法也比较少，如：CN200910305940.0提供的提取结合结晶溶剂法及CN201110001000.X中结晶结合柱层析法；但这些制备方法，但都不是很理想，存在效率低、周期长，不适合工业化生产。因此研究稳定、高效率的莱鲍迪甙C 制备方法是大家想要解决问题的方法。

本发明与CN201110001000.X相比具有步骤少，层析速度快且效率高等优点。本发明使用的高压色谱柱是我公司自己研发制备的色谱柱。

高压制备色谱柱液料及流动相如何在填料中均匀分布，降低柱壁效应，也是达到最佳分离效果的关键因素。目前，普通筛选网及分配盘多为圆环状或网状结构，不能很好解决色谱带横向均匀分布的问题。我公司研制的色谱柱能很好的解决上述问题，达到快速、高效层析。且获得产品纯度比较高在97%以上。

发明内容

本发明的目的在于提供一种以甜菊糖为原料应用轴向高压制备色谱柱工业化制备高纯度莱鲍迪甙C分离工艺，从而获得高纯度莱鲍迪甙C产品。

为实现上述目的本发明采用的实施方案如下：

一种高纯度莱鲍迪甙C的制备工艺，实施步骤如下：

以甜菊糖为原料，原料中RC的含量为15%-45%之间，采用轴向高压制备色谱柱（其结构见CN201020147413.X）层析技术，制备高纯度的莱鲍迪甙C产品；其步骤如下：

（1）取甜菊糖，加甲醇溶解，拌入硅胶，干燥，将拌样硅胶及空白硅胶装于

色谱柱中进行层析。

（2）将拌好样品的硅胶装入高压层析柱，轴向压缩硅胶柱床，冲柱平衡柱

床，平衡好后，加入三氯甲烷或二氯甲烷与含水醇的混合溶剂洗脱，收集洗脱液，采用薄层监测，将莱鲍迪苷C主段合并，减压浓缩，干燥，检测，得到高纯度莱鲍迪苷C。