[发明专利]包含灭活的基孔肯亚病毒株的疫苗组合物

权利要求书

1.一种疫苗组合物，包含基孔肯亚病毒抗原，其中所述基孔肯亚病毒抗原是灭活的基孔肯亚病毒株TN01610，所述基孔肯亚病毒株TN01610含有在SEQ ID NO.1中公开的核苷酸序列，所述核苷酸序列用于结构抗原在真核或原核表达载体中的重组克隆和表达以用作针对基孔肯亚病毒感染的潜在疫苗候选者。

2.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述基孔肯亚病毒株具有单个的对应于E1结构糖蛋白中的E1-K211E的结构多蛋白中的非同义突变K1020E或其与其它突变的组合，所述组合为基孔肯亚病毒株TN01610中的E1-211蛋白的K1020E与E2-55蛋白的G380R、E2-264蛋白的V589A的组合。

3.根据权利要求1所述的疫苗组合物，包含在对应于核苷酸SEQ ID NO.1的SEQ ID NO.8中公开的结构多蛋白序列，用作抗基孔肯亚病毒感染和其任何基因型或突变体的疫苗抗原。

4.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述基孔肯亚病毒抗原是所述基孔肯亚病毒株的衣壳蛋白和结构糖蛋白的组合，包含用于表达为病毒样粒子的C-E3-E2-6K-E1、C-E2-E1和E2-E1蛋白。

5.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中用于表达所述基孔肯亚病毒株的重组蛋白的原核表达系统是大肠杆菌(E.coli)，且用于表达所述基孔肯亚病毒株的重组蛋白的真核表达系统是酵母巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)。

6.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述基孔肯亚病毒通过以下方法灭活：

v)通过暴露所述基孔肯亚病毒于来自⁶⁰Co源的10kGy(Kilo Gray)到25kGy的剂量的伽马辐照。

7.根据权利要求1所述的疫苗组合物，所述疫苗组合物还包含选自以下的佐剂(a)氢氧化铝(b)磷酸铝(c)γ菊粉，(d)algammulin：氢氧化铝和γ菊粉的组合(e)油包胆钙化醇(f)水包油乳剂OWEM1，在10mM磷酸-柠檬酸缓冲液中含有角鲨烯、吐温-80和Span-85，(g)水包油乳剂OWEM2，在磷酸-柠檬酸缓冲液中含有角鲨烯、吐温-80、Span-85、α生育酚，(h)水包油乳剂OWEM3，在磷酸-柠檬酸缓冲液中含有角鲨烯、吐温-80、Span-85、胆钙化醇。

8.根据权利要求1所述的疫苗组合物，其中所述基孔肯亚病毒抗原的剂量范围为在40mM磷酸缓冲液和150mM NaCl中的从1μg到100μg的每人用剂量。

9.根据权利要求1所述的疫苗组合物在制备用于在人类个体中针对基孔肯亚病毒感染引起保护性免疫应答的疫苗制剂中的用途，其中所述疫苗制剂通过选自肌肉内、皮内、皮下、静脉内、口服或鼻内的任何途径施用至人。

10.结构多蛋白基因序列公开于SEQ ID NO.1的基孔肯亚病毒株和如SEQ ID NO.8公开的所述结构多蛋白基因序列翻译的蛋白质在制备用于在人类中检测基孔肯亚病毒感染的免疫诊断剂中的用途。

11.一种组合疫苗组合物，所述组合疫苗组合物包含灭活的基孔肯亚病毒抗原和灭活的日本脑炎全病毒粒子抗原和选自以下的佐剂(a)氢氧化铝(b)磷酸铝(c)γ菊粉，(d)algammulin：氢氧化铝和γ菊粉的组合(e)油包胆钙化醇(f)水包油乳剂OWEM1，在10mM磷酸-柠檬酸缓冲液中含有角鲨烯、吐温-80和Span-85，(g)水包油乳剂OWEM2，在磷酸-柠檬酸缓冲液中含有角鲨烯、吐温-80、Span-85、α生育酚，(h)水包油乳剂OWEM3，在磷酸-柠檬酸缓冲液中含有角鲨烯、吐温-80、Span-85、胆钙化醇，用于在人类中引起抗基孔肯亚病毒和日本脑炎病毒感染的保护性免疫应答，

所述基孔肯亚病毒抗原是如权利要求1所述的基孔肯亚病毒抗原。