[发明专利]一种沙丁胺醇人工抗原合成方法及在胶体金免疫试纸条的应用有效

专利信息
申请号: 201210588392.9 申请日: 2012-12-31
公开(公告)号: CN103073635A 公开(公告)日: 2013-05-01
发明(设计)人: 陈观银;黄显会;李帅鹏 申请(专利权)人: 华南农业大学
主分类号: C07K14/765 分类号: C07K14/765;C07K14/77;G01N33/558
代理公司: 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人: 任重
地址: 510642 广*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 一种 沙丁胺醇 人工 抗原 合成 方法 胶体 免疫 试纸 应用
【权利要求书】:

1.一种沙丁胺醇人工抗原,其特征在于所述沙丁胺醇人工抗原的结构式如式(Ⅰ)所示:

所述protein即载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清蛋白。

2.一种制备如权利要求1所述沙丁胺醇人工抗原的方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1.将硫酸沙丁醇溶于PB缓冲液中得到硫酸沙丁胺醇溶液;

S2.向S1所述硫酸沙丁胺醇溶液中加入甲醛,反应;

S3.向S2加入载体蛋白进行偶联反应,反应后透析,收集透析液即得沙丁胺醇人工抗原;

其中,S3中所述载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清蛋白。

3.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,S3中所述载体蛋白为牛血清白蛋白时,硫酸沙丁胺醇与牛血清白蛋白的质量比为5~10:1;载体蛋白为卵清蛋白时,硫酸沙丁胺醇与卵清蛋白的质量比为1:50~100。

4.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,S1中所述PB缓冲液的pH值为6.0,浓度为0.05M。

5.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于, S2中所述甲醛的用量按照50mg硫酸沙丁醇加100~200ul甲醛的比例确定。

6.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,S2中所述反应的时间为5~20分钟;S3中偶联反应的时间为24~48小时。

7.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于, S3中所述透析是采用磷酸盐缓冲液为透析液,所述磷酸盐缓冲液pH值为7.38~7.45,浓度为0.01M/L。

8.根据权利要求2所述制备方法,其特征在于,S3中所述载体蛋白为牛血清白蛋白时,合成的抗原为沙丁胺醇免疫原;所述载体蛋白为卵清蛋白时,合成的抗原为沙丁胺醇包被原。

9.一种利用权利要求1或2所述沙丁胺醇人工抗原的沙丁胺醇胶体金法检方法。

10.根据权利要求9所述方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

S1.用权利要求8所述沙丁胺醇免疫原免疫动物;

S2.收集并纯化抗体;

S3.将抗体喷涂于玻璃纤维纸上得到胶体金-多抗结合物玻璃纤维条;

S4.将权利要求8所述沙丁胺醇包被原喷涂于硝酸纤维素膜上制备检测线,同时将羊抗兔IgG二抗喷涂于硝酸纤维素膜上制备质控线;

S5.将样品垫、S3中胶体金-多抗结合物玻璃纤维条、S4中含检测线和质控线的硝酸纤维素膜和吸水纸组装成胶体金试纸条;

S6.检测。

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