[发明专利]一种柱转换测定尿液中CEMA和HEMA含量的方法

权利要求书

1.一种柱转换测定尿液中CEMA和HEMA含量的方法，其特征在于：

包括以下工艺步骤：

a、收集志愿者尿液；

b、样品前处理：尿液在室温下解冻，混合均匀，准确移取0.5 mL的尿液，加入20 μL的甲酸和10 μL混合内标，加入470 μL的50 mM的甲酸铵水溶液（甲酸调节到pH=2.5），混匀后在10000 rpm的条件下离心5 min，取上清液过0.22 μm的聚醚砜水相滤膜，进LC-MS/MS分析；

c、标准工作液的配制：用甲醇配制不同浓度的CEMA和HEMA标准工作溶液；

d、液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）测定，吸取配制好的不同浓度的CEMA和HEMA标准工作溶液，注入LC-MS/MS系统，CEMA的线性回归方程为y =0.0372x +0.0489, HEMA的线性回归方程为y = 0.0291x + 0.0144，其中Y代表分析物与内标峰面积的比值，X表示尿液中目标分析物的浓度，相关系数大于0.999，对样品待测液进行测定，测得分析物与内标峰面积的比值，代入一元线性回归方程，求得样品待测液中分析物的含量。

2.根据权利要求1所述的柱转换测定尿液中CEMA和HEMA含量的方法，其特征在于：混合内标为氘代内标，氘代内标浓度为1 μg/mL。

3.根据权利要求1所述的柱转换测定尿液中CEMA和HEMA含量的方法，其特征在于：在LC-MS/MS测定中，选取限进色谱材料色谱柱LiChrospher? RP-8 ADS 24×4 mm（25 μm）和Agilent Zorbax Eclipse Plus C18 （2.1×150 mm, 3.5 μm）色谱柱，流动相A：0.1% 甲酸水溶液，流动相B：乙腈；采用梯度洗脱，分析时间为25 min，进样量为2 μL。

4.根据权利要求3述的柱转换测定尿液中CEMA和HEMA含量的方法，其特征在于：梯度洗脱条件如表1：

表1 梯度洗脱以及柱切换条件

 。

5.根据权利要求1所述的柱转换测定尿液中CEMA和HEMA的方法，其特征在于：串联质谱检测器的条件：电喷雾离子源，多反应监测负离子扫描方式；喷雾电压（IS）：-4400V，雾化气（Gas1）：55 psi，气帘气压力（CUR）：35 psi，辅助雾化气（Gas2）：50 psi，离子源温度（TEM）：530 °C，进口电压（EP）：-10 V，出口电压（CXP）：-10 V，驻留时间：100 ms。