[发明专利]一种SRAP分子标记中的盆底衬膜染色技术

说明书

技术领域

一种SRAP分子标记中的盆底衬膜染色技术属于分子技术领域，更具体地说是一种通过操作方法的改进节约染色液用量，同时提高SRAP分子标记谱带清晰度的技术。

背景技术

硝酸银染色是SRAP分子标记中应用较广的一种重要的DNA染色技术，通过染色能够清晰准确地看到DNA扩增后的SRAP分子标记谱带。染色的过程是将电泳后含有DNA片段的聚丙烯酰胺胶放在硝酸银染液中进行震荡染色。硝酸银是一种比较昂贵的试剂，为了节约硝酸银的用量，需要减少染色盆中硝酸银染液的一次性注入量，这就带来一个问题，染色液注入少时，聚丙烯酰胺胶块容易同盆底部接触，与盆底上的突出物及细微的划痕接触摩擦，很容易导致聚丙烯酰胺胶的表面产生划痕，影响染出谱带的清晰度。

发明内容

一种SRAP分子标记中的盆底衬膜染色技术发明的目的是提供一种既能节约硝酸银染色液，又能提高染出的DNA谱带清晰可读的技术。

本发明是这样实现的：

1. 一种SRAP分子标记中的盆底衬膜染色技术的特征在于，在染色盆中衬入一块塑料薄膜，在塑料薄膜的下方注入清水，在薄膜上方盛放硝酸银染色液对电泳后含有DNA片段的聚丙烯酰胺胶块进行震荡染色。

2.所述薄膜下方的水层厚度为1-2cm。

3.所述塑料薄膜的厚度为0.04-0.06mm。

4.所述的塑料薄膜漂浮在清水的上方

5.所述的塑料薄膜的上部包在染色盆的边沿上。

有益效果：

本发明利用塑料薄膜和其下的水层在染色盆中创造了新的容器环境，盛放在塑料薄膜上方的聚丙烯酰胺胶只要加注少量的硝酸银染色液即可进行染色。在染色过程中，染色盆的震荡使薄膜下方水波起伏，带动薄膜和聚丙烯酰胺胶及染色液一起晃动，聚丙烯酰胺胶不会与盆底接触，不会与盆底产生摩擦，也不会在聚丙烯酰胺片上产生划痕，染出的DNA扩增谱带清晰可读，既节约硝酸银染液用量，又提高了染色的效果。

具体实施方式

下面通过具体实施实例对一种SRAP分子标记中的盆底衬膜染色技术进行进一步的说明

具体实施实例一.甜叶菊的SRAP分子标记染色

在塑料染色盆4中衬入一块厚度为0.04mm的塑料薄膜1，在塑料薄膜的下方注入清水3，水层厚度为1-2cm，塑料薄膜漂浮在水面上，塑料薄膜超出水面的部分贴在盆的内边并包在染色盆的边沿上。在薄膜上方加入1.5cm左右深度的硝酸银染色液2对甜叶菊SRAP分子标记电泳后的聚丙烯酰胺胶块进行震荡染色，染出的甜叶菊DNA扩增谱带清晰可读。而直接在塑料盆中进行染色需要加入2.5cm左右深度以上的硝酸银染色液染出的聚丙烯酰胺胶块不被盆底划伤。采用本发明可以节省约40%的硝酸银染色液用量。

具体实施实例二.烟草的SRAP分子标记染色

在塑料染色盆中衬入一块厚度为0.04mm的塑料薄膜，在塑料薄膜的下方注入清水，水层厚度为1-2cm，塑料薄膜漂浮在水面上，塑料薄膜超出水面的部分贴在盆的内边并包在染色盆的边沿上。在薄膜上方加入1.5cm左右深度的硝酸银染色液对烟草SRAP分子标记电泳后的聚丙烯酰胺胶块进行震荡染色，染出的烟草DNA扩增谱带清晰可读。而直接在塑料盆中进行染色需要加入2.5cm左右深度以上的硝酸银染色液染出的聚丙烯酰胺胶块不被盆底划伤。采用本发明可以节省约40%的硝酸银染色液用量。

具体实施实例三.滁菊的SRAP分子标记染色

3.在塑料染色盆中衬入一块厚度为0.04mm的塑料薄膜，在塑料薄膜的下方注入清水，水层厚度为1-2cm，塑料薄膜漂浮在水面上，塑料薄膜超出水面的部分贴在盆的内边并包在染色盆的边沿上。在薄膜上方加入1.5cm左右深度的硝酸银染色液对滁菊SRAP分子标记电泳后的聚丙烯酰胺胶块进行震荡染色，染出的滁菊DNA扩增谱带清晰可读。而直接在塑料盆中进行染色需要加入2.5cm左右深度以上的硝酸银染色液染出的聚丙烯酰胺胶块不被盆底划伤。采用本发明可以节约约40%的硝酸银染色液用量。