[发明专利]一种黄鳝精子稀释液及制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及黄鳝的精子技术领域，更具体涉及一种黄鳝精子稀释液，同时还涉及一种黄鳝精子稀释液的制备方法，适合所有黄鳝品种。

背景技术

黄鳝(Monopterus albus)为亚热带鱼类，又名鳝鱼、罗鱼、田鳝、长鱼、黄参、无鳞公子、田参等，隶属于合鳃目、合鳃科；合鳃目中全世界只有1个种，即黄鳝。广泛分布于东南亚的日本、泰国、印度尼西亚、菲律宾、马来西亚、印度、日本、朝鲜和我国等，我国除青藏高原以外均有分布，尤以长江中下游地区，分布密度大，产量高，是一种重要的经济鱼类。

为了能进一步开展黄鳝的新品种选育，以及黄鳝的人工繁殖，为市场提供更优质的黄鳝新品种和苗种，需要进行黄鳝精子超低温保存和人工繁殖。然而，无论是精子的超低温保存，还是进行人工繁殖，都需要一种稀释液对黄鳝精子进行稀释。这是因为黄鳝精液中所含精子的密度很高，一般可以达到1.4~1.8×10⁹个/ml。当对黄鳝精子进行超低温保存时，含高密度精子的精原液是不能直接进行超低温冷冻保存的。因为在冷冻过程中，当温度降到0℃~－20℃区间时，被保存的精液中会形成冰晶，冰晶像锋利的刀一样刺向四周的精子，将精子刺破。精液中的精子密度越高，精子被刺破的概率也越高。这种在冷冻过程中冰晶对精子的物理损伤将直接导致精子超低温冷冻保存的失败。因此，冷冻前必须要对精子进行稀释，这就需要有一种适合黄鳝精子的精子稀释液。而在进行人工繁殖时，由于黄鳝精液中含精子的密度很高，且精液量很少，如果直接用来进行人工授精，不仅对非常宝贵的精液是一种浪费，而且，因为精子密度过高，精液的黏稠度增加，使精子不易与卵子混合均匀，从而导致授精效果也不好。如果对精液进行稀释后，再用来进行人工授精，可大大降低人工授精的成本，同时还能起到很好的授精效果，获得较高的受精率。因此，黄鳝精子稀释液的作用就是在不激活精子的前提下，对精子进行稀释，使精子尽可能的保持其原有的生物学特性。

然而，精子稀释液是有一定要求的。每种鱼类的精子都有自己一定的渗透压，不同种鱼类的渗透压是不同的。鱼类的精子在未遇见水或其它溶液前始终处在休眠状态，淡水鱼类只有在遇见低于自己渗透压的溶液或淡水时才能被激活，而海水鱼类则要遇见高于自己渗透压的溶液或海水时才能被激活。精子一旦被激活，很快会衰减死亡。精子的寿命一般很短，短的只有几十秒，长的也就几十分钟。要想对精子进行稀释，首先要保证精子在稀释液中不会被激活。这就要求每种鱼的精子稀释液必须与这种鱼的精液渗透压尽可能的相等。稀释液的渗透压是由稀释液中的离子浓度总和决定的，不同浓度的稀释液就有不同的渗透压，调节稀释液中的离子浓度就能调节这种稀释液的渗透压，从而达到与精液等渗的效果。除此之外，稀释液中不同的离子成分对精子又有不同的作用。如：稀释液中的Na离子主要是起调节稀释液渗透压的作用；K离子起着改变精子膜表面通透性的作用；Ca、Mg离子则起着增加或降低精子运动速度的作用；而CO₃离子则起着调节稀释液pH的作用等。除此之外，有报道显示葡萄糖等大分子类溶质除了起到调节渗透压的作用外，还具有提供精子能量的作用。因此，不同的鱼不仅稀释液浓度完全不同，而且，根据精子的生物学特性，其离子成分也会有很大差异。

发明内容

本发明的目的是在于提供了一种黄鳝精子稀释液，配方合理，使用方便，适合对黄鳝精子的稀释，是黄鳝精子超低温保存和进行人工授精所必须的一种溶液。在黄鳝精子超低温保存过程中，可确保精子不会被激活，并最大限度降低冰晶对精子的损伤。在进行黄鳝人工授精过程中，可有效稀释精子，降低人工授精成本，提高受精率。

本发明的另一个目的是在于提供了一种黄鳝精子稀释液的制备方法，方法易行，操作简便，适合配制各种体积的稀释液，可确保所配制稀释液中个组分浓度的准确性。

为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施：

一种黄鳝精子稀释液，它由以下重量份的原料制成：

稀释液渗透压为326.6~390.2mOsM，pH为7.5-8.5；

一种黄鳝精子稀释液，它由以下重量份的原料制成（较好范围）：

稀释液渗透压为343.7~383.1mOsM，pH为7.6-8.4。

一种黄鳝精子稀释液，它由以下重量份的原料制成（优选范围）：

稀释液渗透压为349.9~376.9mOsM，pH为7.7-8.3。

一种黄鳝精子稀释液，它由以下重量份的原料制成（最佳范围）：