[发明专利]一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法

说明书

技术领域

本发明属于新物质提取领域，具体涉及一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法。

背景技术

莫勒菌(Moelleriella)是虫生真菌的重要成员，其无性型为类座壳孢(Aschersonia-like)，由于它能引起粉虱和介壳类昆虫群体性流行病的发生，这使得它有可能成为有用的生物防治剂。随着研究的深入，近年来人们发现莫勒菌的代谢产物具有抗菌、抗肿瘤和抗疟原虫等生物活性，这预示该菌在生物农药或医药上存在很大应用价值。

由于人们在现代社会患癌症的概率较大，因此，寻找不同来源的抗癌药物已经越来越得到人们的关注。虫生真菌的代谢产物中含有多肽、生物碱、萜类化合物、甾醇等多种具有杀虫、抗肿瘤、抗炎、抗菌等活性物质，因此，充分开发利用虫生真菌，将有利于人类医疗水平的发展。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法，本发明以繁殖快、周期短的真菌为材料，成本低，操作简单，重复性好，无需昂贵的仪器，通过多次进行硅胶柱层析，得到一种新化合物，通过对人类胃癌细胞株BGC823进行活性测定，得到的数据说明该种新化合物有优异的抗肿瘤活性，促进其药理学的研究和作为先导化合物的开发和应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种从莫勒菌中提取双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的方法包括以下步骤：

（1）将莫勒菌（邱君志等，赭色小莫勒菌在中国的发现. 菌物学报，2009. 28(1): 148-150）活化后，取菌块接种PDB培养基中，在160r/min、25℃条件下连续培养7天即初级培养，按10％接种量再次转接到PDB培养基中，继续在160r/min、25℃条件下连续培养28天即次级培养；

（2）减压抽滤得到菌丝体，菌丝体在40℃下恒温干燥后研磨成粉状，过筛，用乙酸乙酯浸泡，超声，重复3次；合并浸泡液，旋蒸得菌丝体浸膏；

（3）将菌丝体浸膏上200~300目硅胶柱，进行粗分；先用石油醚洗脱，之后换石油醚：二氯甲烷体积比=10:1洗脱，收集该部位洗脱液，旋蒸浓缩；

（4）将步骤（3）得到的浓缩物继续上200~300目硅胶柱，以石油醚：丙酮体积比=25:1梯度洗脱，收集石油醚：丙酮体积比=20:1部位洗脱液，旋蒸浓缩；

（5）将步骤（4）得到的浓缩物进一步上200~300目硅胶柱，先以石油醚洗脱，之后换石油醚：丙酮体积比=20:1梯度洗脱，最后以二氯甲烷：丙酮体积比=10:1梯度洗脱，收集二氯甲烷：丙酮体积比=1:1部位洗脱液，旋蒸浓缩，氯仿洗出，自然挥干，甲醇重结晶，即得到双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧，结构式如下：

。

所述步骤（1）中接种菌块的大小为0.5×0.5cm，接种量为4块。所述PDB培养基的制备为：马铃薯去皮，切块，称取200g，沸水煮30min，6层纱布过滤，称取20g葡萄糖，加蒸馏水定容至1000mL，pH自然。高压灭菌121℃，20min。

所述步骤（2）中要用3倍体积乙酸乙酯浸泡24小时，超声1小时。

所述重结晶具体操作为：用氯仿将得到的含有少量杂质的双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧溶解，自然挥干，待晶体析出后，再用甲醇洗去杂质，析出弃掉，剩余的晶体再用甲醇溶解后重结晶，直至获得单一的双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧。

本发明的有益效果在于：本发明以繁殖快、周期短的真菌为材料，成本低，操作简单，重复性好，无需昂贵的仪器，通过多次进行硅胶柱层析，制得了一种新化合物双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧。通过对人类胃癌细胞株BGC823进行活性测定，得到的数据说明该种新化合物有优异的抗肿瘤活性。

具体实施方式

实施例1：双苯恶庚因-11(6H)酮-1，10-二羟基，3 -甲基-7，8-二甲氧的制备