[发明专利]一种座壳孢次生代谢产物的提取方法

权利要求书

1.一种座壳孢次生代谢产物的提取方法，其特征在于：所述方法的具体步骤为：

 1)初级、次级培养：座壳孢菌活化后，取菌块接种到PDB培养基中，在130～160r/min、24~28℃条件下连续培养7～10天即初级培养，按8％～10％接种量再次转接到PDB培养基中，在24℃～28℃条件下静止培养35～40天即得次级代谢产物；

2)冷浸提取：菌液与菌丝体过滤分离，菌丝体在3℃～12℃的有机溶剂中浸泡48～100小时，过滤得浸泡液，旋蒸温度控制在35℃～40℃得浸膏，回收有机溶剂；

3)摇瓶萃取：加水溶解浸膏，水与浸膏重量比为50:1～100:1，将水溶物倒入分液漏斗中，加入1～2倍的乙酸乙酯进行摇瓶萃取，摇瓶转速为150r/min～280r/min，摇20～60min后静止100min～200min，取乙酸乙酯部分，旋蒸浓缩得到粗提物，回收乙酸乙酯。

2.根据权利要求1所述的一种座壳孢次生代谢产物的提取方法，其特征在于：所述PDB培养基的制备为：200g马铃薯，20g葡萄糖，沸水煮30min，经4层纱布过滤后加单蒸水定容至1L。

3.根据权利要求1所述的一种座壳孢次生代谢产物的提取方法，其特征在于：所述步骤2)中的菌丝体在4℃～10℃的有机溶剂浸泡48～72小时。

4.根据权利要求1所述的一种座壳孢次生代谢产物的提取方法，其特征在于：所述步骤2)中的有机溶剂为丙酮、乙醇、甲醇中的任一种。

5.根据权利要求1所述的一种座壳孢次生代谢产物的提取方法，其特征在于：步骤3) 所述的摇瓶萃取条件为200～250r/min摇20～40min后静止100～150min。

6.根据权利要求1所述的一种座壳孢次生代谢产物的提取方法，其特征在于：步骤3)所获得的粗提取物通过GC-MS检测 。