[发明专利]白血病细胞蛋白质谱特征分子的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种白血病细胞特征分子的检测方法，特别是一种检测特征分子（未知蛋白质）在不同类型白血病细胞中表达的敏感性和特异性的方法。

背景技术

目前血液病的分子检测方法尤其是白血病传统分型（WHO分型）包含了造血细胞形态学信息、免疫学信息及遗传学信息，尚缺乏蛋白质组学特别是质谱特征信息。蛋白质是生命活动及疾病发生发展的物质基础。随着高通量质谱检测方法（SELDI）的发展，质谱检测方法在疾病的早期检测、疗效观察、微小残留病监测等方面展现了良好的临床应用前景，通过质谱检测发现了大量差异蛋白，特别是有关肿瘤细胞蛋白质谱特征的研究，为恶性肿瘤的早期监测和发现带来新的手段。目前，以单抗为探针检测单个白血病活细胞的蛋白质表达，根据免疫表型分型进行白血病蛋白质免疫分型，具有及时、准确的特点，是临床检测白血病细胞的主要手段，在白血病诊治活动中具有重要作用。然而，这种检测方法以已知蛋白质（单抗检测的抗原）为基础，可检测蛋白质数量仅数十种，对白血病细胞的蛋白质信息的了解很不全面，不能更好地指导白血病治疗。白血病细胞表达的蛋白质数量超过千种，检测其包含未知蛋白质在内的蛋白质组将能获得更多重要信息。目前，关于白血病细胞的蛋白质组特征分子的信息都是基于单个类型白血病的质谱研究，这种研究可以发现特征分子，但不能明确特征分子的多种特性及其分类价值，对进一步纯化和鉴定特征分子缺乏指导作用。对不同类型白血病细胞的蛋白质谱特征分子的研究可以解决该缺点，但尚缺乏可行的分析方法。

发明内容

本发明的目的是提供一种白血病细胞蛋白质谱特征分子的检测方法，要解决的技术问题是建立白血病细胞的蛋白质谱分析模型。

本发明提供了一种白血病细胞蛋白质谱特征分子的检测方法，包括如下步骤：

步骤一：用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱仪测定四种不同白血病：早幼粒细胞白血病、急性髓系粒细胞白血病、急性髓系单核细胞白血病、急性淋巴细胞白血病及对照组健康骨髓中的单个核细胞的蛋白质谱图，并将其集合成蛋白质谱图库；

步骤二：应用蛋白质芯片数据采集系统、生物标志物向导系统处理所述蛋白质谱图库形成蛋白质谱图数据库，再用生物标志物分析系统对蛋白质谱图数据库进行分析，以蛋白质谱图数据库的特征分子建立白血病细胞蛋白质谱分析模型；

步骤三：从白血病细胞蛋白质谱分析模型中读取不同类型白血病细胞的特征分子及其表达特性，筛选出用来显著区分各组的特征分子:健康骨髓单个核细胞特征分子M3667和M3829；早幼粒细胞白血病特征分子M1593和M1695；急性髓系粒细胞白血病特征分子M2121；急性髓系单核细胞白血病特征分子M2536；急性淋巴细胞白血病特征分子M1016。

所述步骤二中白血病细胞蛋白质谱分析模型中检测四种白血病细胞和健康细胞的差异蛋白优选由以下蛋白质质荷比峰组成：3667m/z，1593m/z，2536m/z，3680m/z，1133m/z，1047m/z，4884m/z，3025m/z；2121m/z，2678m/z，1212m/z，1097m/z，11156m/z，1503m/z，1695m/z，1964m/z，1215m/z，5539m/z，1000m/z，1213m/z，1497m/z，1111m/z。

所述步骤二中白血病细胞蛋白质谱分析模型中：

检测急性淋巴细胞白血病的差异蛋白优选由以下蛋白质质荷比峰组成：

3667m/z，1593m/z，2536m/z，3680m/z，1047m/z，

或3667m/z，1593m/z，2536m/z，3680m/z，1133m/z，4484m/z，1215m/z，

或3667m/z，1593m/z，2536m/z，1097m/z，5539m/z，

或3667m/z，1593m/z，1695m/z，3025m/z，1503m/z，

或3667m/z，1593m/z，1695m/z，3025m/z，1503m/z，1000m/z，

或3667m/z，1593m/z，1695m/z，3025m/z，1212m/z，1213m/z，

或3667m/z，1593m/z，1695m/z，2121m/z，11156m/z，2678m/z，1111m/z；

检测早幼粒细胞白血病的差异蛋白优选由以下蛋白质质荷比峰组成：

3667m/z，1593m/z，1695m/z，3025m/z，1212m/z，1213m/z，