[发明专利]一种用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒

权利要求书

1.一种用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒，其特征在于，包括检测印迹膜和标准带； 

所述检测印迹膜依次包括起始带、检测带和质控带；所述检测带转印有胰岛细胞抗原、酪氨酸磷酸酶抗原、谷氨酸脱羧酶抗原、锌转运蛋白8抗原、羧基肽酶抗原、胰岛素自身抗原； 

所述标准带的制备方法为：取胰岛细胞抗体、酪氨酸磷酸酶抗体、谷氨酸脱羧酶抗体、锌转运蛋白8抗体、羧基肽酶抗体、胰岛素自身抗体经梯度不连续电泳后转印至硝酸纤维素膜，显色后，获得标准印迹膜，根据所述标准印迹膜上各阳性区带分别与起始带、质控带的相对距离，获得所述标准带。 

2.根据权利要求1所述的用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒，其特征在于，所述标准带与所述标准印迹膜中相应阳性区带的误差小于0.5mm。 

3.根据权利要求2所述的用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒，其特征在于，还包括浓缩洗涤液、工作液、酶联试剂和显色液。 

4.根据权利要求3所述的用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒，其特征在于，还包括与所述检测印迹膜相配合的反应槽，所述反应槽与所述检测印迹膜可拆卸连接。 

5.根据权利要求4所述的用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒，其特征在于，所述检测印迹膜的制备方法为取胰岛细胞抗原、酪氨酸磷酸酶抗原、谷氨酸脱羧酶抗原、锌转运蛋白8抗原、羧基肽酶抗原、胰岛素自身抗原经梯度不连续电泳后转印至硝酸纤维素膜，即得。 

6.根据权利要求3所述的用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒，其特征在于，所述酶联试剂的制备方法为取磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、硫柳汞与水混合溶解，与小牛血清、酶标记物混合后，加水稀释，调节pH值为7.0～7.4，混匀，即得； 

所述酶标记物为辣根过氧化物酶标记抗人IgG（效价1:100）； 

所述磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、硫柳汞的质量比为20:1:1； 

以g/mL/mL/mL计，所述磷酸二氢钾与所述小牛血清、所述酶标记物、所述酶联试剂的质量体积比为1:70:47:140 。

7.根据权利要求3所述的用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒，其特征在于，所述显色液的制备方法为取3,3’,5,5’-四甲基联苯胺与0.02mol/L的pH值为5.0的磷酸盐/柠檬酸缓冲液混合，与H₂O₂混合后，调节pH值为4.8～5.2，混匀，即得； 

以g/mL/mL/计，所述3,3’,5,5’-四甲基联苯胺与磷酸盐/柠檬酸缓冲液、H₂O₂的质量体积比为0.5:1000:0.1。 

8.根据权利要求3所述的用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒，其特征在于，所述浓缩洗涤液的制备方法为取氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾溶于水后，与吐温-20混合，加水后调节pH值为7.0～7.4，混匀，即得； 

所述氯化钠、所述磷酸氢二钠、所述磷酸二氢钾的质量比为30:20:1； 

以g/mL/mL/计，所述氯化钠与所述吐温-20、所述浓缩洗涤液的质量体积比为9:5:70。 

9.根据权利要求3所述的用于糖尿病自身抗体6项联检试剂盒，其特征在于，所述工作液的制备方法为取氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾溶于水后，与小牛血清白蛋白混合，加水后调节pH值为7.0～7.4，混匀，即得； 

所述氯化钠、所述磷酸氢二钠、所述磷酸二氢钾、所述小牛血清白蛋白的质量比为90:60:3:10； 

以g/mL计，所述氯化钠与所述工作液的体积比为9:1000。