[发明专利]一种落花生茎叶药材的指纹图谱建立方法

权利要求书

1.一种落花生茎叶药材指纹图谱的建立方法，其特征在于：所述方法采用HPLC法，其条件为： 

色谱柱：C18烷基硅烷键合硅胶为填充材料； 

流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.2%体积分数甲酸水溶液，进行梯度洗脱；检测波长：286nm。 

2.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于：所述梯度洗脱程序如下，其中流动相比例均为体积百分比： 

0～15min，流动相A为0～5%，流动相B为100%～5%； 

15～60min，流动相A为5%～30%，流动相B为95%～70%； 

60～80min，流动相A为30%～50%，流动相B为70%～50%； 

80～100min，流动相A为50%～100%，流动相B为50%～0%。 

3.根据权利要求1或2所述的建立方法，其特征在于： 

所述HPLC法检测包括以下步骤： 

1）制备对照品溶液； 

2）制备供试品溶液； 

3）测定：根据以下色谱条件进行测定，得到指纹图谱： 

色谱柱： C18烷基硅烷键合硅胶为填充材料，5μm，2.5×460mm； 

流动相：流动相A为乙腈，流动相B为0.2%体积分数甲酸水溶液，进行梯度洗脱； 

流速：1.0mL/min； 

检测波长：286nm； 

理论塔板数按原儿茶酸峰计算，应不低于6000。 

4.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述的制备对照品溶液按如下步骤：取原儿茶酸对照品适量，加入甲醇溶解制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。 

5.根据权利要求1所述的建立方法，其特征在于，所述的制备供试品溶液按如下步骤：取落花生茎叶药材1.0g，置于烧瓶锥形瓶中，加入70 %体积分数甲醇水溶液100ml，超声提取1h，提取液浓缩至干，用甲醇溶解转移至10ml容量瓶中，用0.45μm滤膜滤过，弃去初滤液，取续滤液即得。 

6.根据权利要求1至5中任一项所述的建立方法，其特征在于，所述建立方法得到的指纹图谱中包括7个共有吸收峰，其中峰1为对照品原儿茶酸，各峰以峰1为参照峰的相对保留时间和相对峰面积如下： 

相对保留时间： 

峰1：1.000；峰2：1.182；峰3：1.547；峰4：2.221；峰5：2.244；峰6：2.307；峰7：4.333； 

相对峰面积： 

峰1：1.000；峰2：7.204；峰3：2.594；峰4：1.452；峰5：2.026；峰6：1.023；峰7：0.421。