[发明专利]一种检测Tim-3的ELISA试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种ELISA试剂盒，具体而言涉及检测人Tim-3的ELISA试剂盒，还涉及该ELISA试剂盒中Tim-3单克隆抗体的制备和试剂盒的使用方法。

背景技术

Tim-3在结构上属于T细胞免疫球蛋白及粘蛋白(T cell Immunoglobulindomain and Mucin domain protein，Tim)家族成员。由于Tim家族广泛参与了机体的免疫调节过程，其功能正日益受到人们的重视。Tim-3特异性表达于活化的Th1、Th17效应细胞表面，而不表达于Th2细胞。现已知半乳糖结合蛋白-9(Galectin-9，Gal-9)为Tim-3的天然配体，该分子广泛表达于外周免疫系统，Gal-9与Th1、Th17细胞上的Tim-3分子特异性结合，可引发后者的调亡，下调免疫反应，诱导免疫耐受。除了膜结合形式的Tim-3分子，可溶性的Tim-3分子是否，以及如何影响免疫调节过程是目前尚不清楚的内容。目前，研究证实Tim-3分子主要通过调节不同CD4⁺ T细胞亚群的功能广泛参与了自身免疫病、移植排斥、抗感染等免疫应答过程[Anderson DE.TIM-3 as a therapeutic target inhuman inflammatory diseases.Expert OpinTher Targets.2007；11(8)：1005-9.Anderson AC，Anderson DE.TIM-3 in autoimmunity.CurrOpinImmunol.2006；18(6)：665-9.Degauque N，Mariat C，Kenny J，et al.Regulation of T-cellimmunity by T-cell immunoglobulin and mucin domain proteins.Transplantation2007；84：S12-16.Zhu C，Anderson AC，Schubart A，et al.The Tim-3 ligand galectin-9negatively regulates T helper type 1 immunity.Nat Immunol 2005；6：1245-1252.]。

目前的研究证实Tim-3表达的异常与许多疾病有密切的关系，如研究发现HIV，HCV感染的患者以及一些肿瘤患者，其T细胞上Tim-3表达升高，由于Tim-3能介导T效应细胞的调亡，传递负性调节信号，可导致机体的免疫功能瘫痪。任何阻断Tim-3/Gal-9结合的因素均可以使Th1、Th17细胞避开死亡，增强T效应细胞的活性，恢复免疫功能[Kassu A，Marcus RA，D′Souza MB，et al.Regulation ofVirus-Specific CD4+ T Cell Function by Multiple Costimulatory Receptors duringChronic HIV Infection.Immunol.2010；185(5)：3007-18.Huang X，et al.Lymphomaendothelium preferentially expresses Tim-3 and facilitates the progression oflymphoma by mediating immune evasion.Exp Med.2010；207(3)：505.N.Castelblanco，V.Kuchroo，D.R.Gretch，and H.R.Rosen.2009.Negative immuneregulator Tim-3 is overexpressed on T cells in hepatitis C virus infection and itsblockade rescues dysfunctional CD4+ and CD8+T cells.Virol.83：9122-9130.]。