[发明专利]一种超级CIK杀伤细胞的制备方法有效
申请号: | 201210407966.8 | 申请日: | 2012-10-24 |
公开(公告)号: | CN102899289A | 公开(公告)日: | 2013-01-30 |
发明(设计)人: | 胡伟明 | 申请(专利权)人: | 扬州维克斯生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078 |
代理公司: | 扬州市锦江专利事务所 32106 | 代理人: | 江平 |
地址: | 225101 江苏省扬州市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 超级 cik 杀伤 细胞 制备 方法 | ||
1.一种超级CIK杀伤细胞的制备方法,其特征在于:先在体外扩增肿瘤杀伤细胞,并加载CTLA4抗体,然后清洗掉多余的CTLA4抗体,即形成超级CIK杀伤细胞。
2.根据权利要求1所述超级CIK杀伤细胞的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
1)在PBMC细胞中加入 ,在37℃ ,5% CO2 孵箱中培养;
2)24小时后加入CD3McAb和IL-2,继续在37℃、5% CO2 孵箱中培养;
3)随后每三天更换新培养液,并添加IL-2;
4)第九天更换液后,加入载有肿瘤抗原的树突细胞,并加入CTLA4抗体;
5)在第12天收集超级CIK杀伤细胞时,加入CTLA4抗体,在室温下静置30分钟,随后用PBS洗涤去除游离的CTLA4抗体,最后悬浮于生理盐水中。
3.根据权利要求1所述超级CIK杀伤细胞的制备方法,其特征在于在所述步骤4)中,所述加入的CTLA4抗体使CTLA4抗体的终浓度到达1ug/ml。
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