[发明专利]一种用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法

权利要求书

1.一种用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法,其特征在于，所述方法是利用一种酚类污染物处理剂处理酚类污染物，所述酚类污染物处理剂含有无载体固定化酪氨酸酶，所述酚类污染物含有酚类化合物，所述酚类污染物处理剂利用所述无载体固定化酪氨酸酶将所述酚类化合物催化反应生成对应的醌类化合物，以去除所述酚类化合物。

2.如权利要求1所述的用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法，其特征在于，所述酚类化合物包括如下化合物中的一种或多种：苯酚、甲基酚、硝基酚、对氯苯酚、壬基酚、辛基酚、氨基酚及双酚A。

3.如权利要求1所述的用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：

利用高效液相色谱法检测所述酚类化合物的残留情况以及处理率。

4.如权利要求1所述的用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法，其特征在于，所述方法还包括如下步骤：

利用水螅对经所述方法处理后的酚类污染物的毒性进行检测。

5.如权利要求1所述的用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法，其特征在于，制备所述无载体固定化酪氨酸酶的方法包括如下步骤：

获取酪氨酸酶酶液；

室温下对所述酪氨酸酶酶液进行搅拌并加入硫酸铵固体，使所述酪氨酸酶酶液的硫酸铵饱和度在0℃时达到50%，并进行沉淀反应10分钟，以获取部分沉淀的酪氨酸酶酶液；

将重量比为12.5%的戊二醛逐滴加入所述部分沉淀的酪氨酸酶酶液中，并在4℃下搅拌反应以获取交联悬浊液，其中，所述12.5%的戊二醛与所述酪氨酸酶酶液的体积比为1:50；

将所述交联悬浊液离心并获取不溶于水的颗粒，用磷酸缓冲液清洗所述颗粒至少一次，所述颗粒即为无载体固定化酪氨酸酶；

将清洗后的所述颗粒冷冻干燥后并研磨粉碎以获取粉末状的无载体固定化酪氨酸酶。

6.如权利要求5所述的用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法，其特征在于，所述获取酪氨酸酶酶液的步骤包括如下步骤：

将酪氨酸酶原料物与摩尔浓度为50毫摩尔每升，pH值为6.0的磷酸缓冲液混合捣碎得到混合液，将所述混合液过滤并获取滤液；

将所述滤液低温冷藏，以获取活性较高的酪氨酸酶粗提液；

将所述酪氨酸酶粗提液进行低温离心并去除沉淀，以获取所述酪氨酸酶酶液。

7.如权利要求6所述的用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法，其特征在于，所述将滤液低温冷藏的步骤包括：

将所述滤液置于-20℃的冰箱中保存至少1个月。

8.如权利要求6所述的用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法，其特征在于，所述酪氨酸酶原料物包括如下物质的一种或多种：马铃薯、香蕉、苹果、山芋、芋艿、蚕豆及蘑菇。

9.如权利要求5所述的用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法，其特征在于，所述4℃下搅拌反应的时间为16小时。

10.如权利要求5所述的用无载体固定化酶去除酚类污染物的方法，其特征在于，所述用磷酸缓冲液清洗颗粒的步骤包括：

用摩尔浓度为50毫摩尔每升，pH值为6.0的磷酸缓冲液清洗所述颗粒。