[发明专利]锌离子作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的应用及其测定方法

权利要求书

1.锌离子作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的应用。

2.一种锌离子作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的测定方法，其特征在于：

1）、配制0.6mM毫摩尔/升的醋酸锌，用50mM乙磺酸pH为6.5的缓冲液逐级稀释成不同浓度，α-葡萄糖苷酶用50mM、pH7.4的磷酸缓冲液配制成3μMα-葡萄糖苷酶液；

2）、将不同浓度的醋酸锌30μL与等体积的α-葡萄糖苷酶液混合，设置不含醋酸锌的30μL缓冲液与等体积的α-葡萄糖苷酶混合作为空白对照，以上体系25℃保温3hr后测定酶活力。

3.根据权利要求1所述的锌离子作为α-葡萄糖苷酶抑制剂的测定方法，其特征在于：用上述50mM、pH7.4的磷酸缓冲液配制10mM pNPG溶液，取600μL分别与上述等体积的醋酸锌溶液和乙磺酸缓冲液空白对照混合，作为测定α-葡萄糖苷酶活性的底物体系。

4.根据权利要求2或3所述的α-葡萄糖苷酶抑制剂的测定方法，其特征在于：活力测定方法步骤如下：先将1mL预热至37℃的含不同浓度Zn²⁺的pNPG底物置于比色皿中，加入5μL对应Zn²⁺浓度的α-葡萄糖苷酶溶液，迅速混合，通过紫外可见分光光度计检测400nm处每分钟吸光值变化来指示反应速度v值，从而表征酶活性的大小，其测定温度为37℃。