[发明专利]一种植物组织透射电镜样品的制备方法无效
申请号: | 201210369929.2 | 申请日: | 2012-09-28 |
公开(公告)号: | CN102841006A | 公开(公告)日: | 2012-12-26 |
发明(设计)人: | 马建锋;张智衡;吉喆;周霞;许凤 | 申请(专利权)人: | 北京林业大学 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28;G01N1/30;G01N23/22 |
代理公司: | 北京元本知识产权代理事务所 11308 | 代理人: | 叶凡;李斌 |
地址: | 100083 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 植物 组织 透射 样品 制备 方法 | ||
1.一种植物组织透射电镜样品的制备方法,其特征是包括在真空状态下对植物组织样品进行Spurr树脂的渗透处理。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征是所述真空状态的绝对压力低于0.09MPa。
3.一种植物组织透射电镜样品的制备方法,其特征是包括如下顺序进行的步骤:
1)软化处理
将植物样品于沸水中煮制处理后置于超纯水中进行浸泡,重复煮制和浸泡直至植物样品沉入水底,制得软化植物组织
2)脱水处理
将软化植物组织置于体积百分比浓度为30-100%的乙醇溶液中浸泡,脱除植物组织中的水分,制得乙醇植物组织;
3)置换处理
将乙醇植物组织依次置于环氧丙烷与乙醇的混合溶液、环氧丙烷换剂中,浸泡,脱出乙醇直至环氧丙烷完全置换出乙醇,制得环氧丙烷植物组织;
4)渗透处理
将环氧丙烷植物组织依次置于Spurr树脂和环氧丙烷混合溶液、Spurr树脂中浸泡,进行渗透处理,Spurr树脂渗透到植物组织细胞中,制得树脂渗透植物组织。
4.如权利要求3所述的方法,其特征是在进行所述的软化处理之前包括:在体视显微镜下利用双面刀片将植物样品切成0.1cm×0.1cm×0.5cm大小的细长条。
5.如权利要求3或4所述的方法,其特征是步骤2)中所述乙醇溶液的体积百分比浓度依次为:30%、50%、70%、90%、100%。
6.如权利要求3或4所述的方法,其特征是步骤3)中进行所述置换处理过程中环氧丙烷和乙醇混合溶液中环氧丙烷与乙醇的体积之比为1-3:1。
7.如权利要求3或4所述的方法,其特征是在所述步骤4)中在真空度状态下进行所述的渗透处理。
8.如权利要求3或4所述的方法,其特征是步骤4)中所述Spurr树脂和环氧丙烷混合溶液中Spurr树脂与环氧丙烷的体积之比为:1-3:1。
9.如权利要求1或2所述的方法,其特征是还包括对树脂渗透植物组织进行切片处理后将样品薄片平铺于铜网上,然后进行染色处理。
10.如权利要求9所述的方法,其特征是所述染色处理所使用的染色剂是质量体积百分比浓度为1-1.5%的高锰酸钾-柠檬酸钠溶液。
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