[发明专利]一种基于量子点—多肽复合物的荧光毛细管电泳检测酶活性的方法

权利要求书

1. 一种基于量子点—多肽复合物的荧光毛细管电泳检测酶活性的方法，其特征在于：首先制备量子点—多肽复合物，多肽用荧光标记，量子点与荧光分子之间可以产生荧光共振能量转移；将量子点与多肽混合后，分别加入不同浓度的酶；然后进行毛细管电泳检测，同时检测量子点和荧光分子标记的多肽通道的荧光强度，将量子点和荧光分子标记的多肽荧光强度的变化换算成酶每分钟切割的多肽浓度作为Y轴，以酶浓度为X轴，曲线拟合得到酶活性检测的参数；其中多肽为含有待测酶识别位点的多肽，其中C端为组氨酸标签序列或半胱氨酸，N端是带负电的氨基酸并用染料分子标记。

2.如权利要求1所述的基于量子点—多肽复合物的荧光毛细管电泳检测酶活性的方法，其特征在于所述的毛细管电泳检测中，电泳缓冲液为25mM硼酸缓冲液，pH9.3。

3.如权利要求2所述的基于量子点—多肽复合物的荧光毛细管电泳检测酶活性的方法，其特征在于：所述硼酸缓冲液经0.22μm滤膜过滤。

4.如权利要求1所述的基于量子点—多肽复合物的荧光毛细管电泳检测酶活性的方法，其特征在于：所述的酶为凝血酶；所述的多肽为含有凝血酶切序列LVPRGS的多肽，其中C端为组氨酸标签序列或半胱氨酸，N端是带负电的氨基酸并用染料分子标记。

5.如权利要求1所述的基于量子点—多肽复合物的荧光毛细管电泳检测酶活性的方法，其特征在于所述染料分子为量子点、TAMRA、罗丹明、Texas Red、Cy3或Cy5，且满足标记生物分子的染料分子与量子点之间可以发生荧光共振能量转移。