[发明专利]一种紫薯花色苷的分级方法

说明书

一、技术领域

本发明为一种紫薯花色苷的分级方法，属于农产品深加工技术领域。 

二、背景技术

国内外关于紫薯的研究表明，紫薯富含花色苷类物质，具有较强的降血压、降血脂、抗突变、抗氧化、抗肿瘤等生理活性和功能。目前已从紫薯中鉴定出20多种花色苷，包括无酰基花色苷、单酰基花色苷和双酰基花色苷，紫薯花色苷绝大多数为酰基花色苷。花色苷作为一种安全无毒的天然食用色素在食品、保健品、医药、化妆品等方面具有很大的开发潜力，但是天然色素易受各种条件的影响而变得不稳定，这就限制了其在加工和储藏过程中的广泛应用。影响其不稳定的主要内部因素是分子结构，酰基化可提高花色苷稳定性和呈色效果已得到学术界公认，双酰化花色苷比单酰化花色苷更稳定。将紫薯花色苷根据酰基化程度进行分级，获得不同酰基化度的花色苷组分，除了为酰基花色苷功能性研究方面提供有用的材料外，还可以获得稳定性不同的天然色素原料，并根据需要进行应用，因此，高效的花色苷分级方法具有重要的理论价值和现实意义。 

三、发明内容

技术问题 天然花色苷分离常见的方法如高效液相色谱法等存在的主要问题是样品制备量小，只能进行分析检测，而且成本较高。本发明主要针对目前不同酰基化度的紫薯花色苷无法实现大量高效分离的技术难题，通过简单的多次柱层析分离方法，将初步纯化的紫薯花色苷根据酰基化度不同进行分级，分别获得无酰基花色苷、单酰基花色苷和双酰基花色苷组分。 

技术方案 本发明提供的一种紫薯花色苷的分级方法，包括： 

1)紫薯花色苷粗提物的制备：将紫薯清洗后切成1厘米小块，加入2倍重量的95％食用酒精，进行高速打浆，60℃保温1小时，冷却，离心。滤液真空浓缩至原重量的十分之一。 

2)紫薯花色苷的纯化：将粗提液上大孔树脂柱，树脂型号为AB-8，上样液量为1倍树脂柱体积，上样流速为1倍柱体积/小时，然后用去离子水冲柱，当流出液澄清后，以体积比70％的乙醇水溶液为洗脱剂洗脱树脂柱，洗脱液为2～2.5倍树脂柱体积，流速为1倍柱体积/小时。将洗脱液真空浓缩至原体积的的五分之一，加入2倍体积的乙酸乙酯萃取脂溶性杂质，收集水相既为纯化后的紫薯花色苷。 

3)花色苷的分级：将萃取后的水相立刻上聚酰胺树脂柱，上样量为0.5倍树脂柱体积，上样流速为1倍柱体积/小时，然后用去离子水冲柱，收集有色部分流出液，为无酰基紫薯花色苷组分。再用以体积比30％的乙醇水溶液为洗脱剂洗脱树脂柱，洗脱液为2～2.5倍树脂柱体积，流速为1倍柱体积/小时，收集洗脱液既为单酰基紫薯花色苷组分。再以体积比70％的 乙醇水溶液为洗脱剂洗脱树脂柱，洗脱液为2～2.5倍树脂柱体积，流速为1倍柱体积/小时，收集洗脱液既为双酰基紫薯花色苷组分。 

有益效果 

1.获得了无酰基花色苷、单酰基花色苷和双酰基花色苷3个组分，具有不同的特性，可作为花色苷理论研究的好材料，也可作为天然食品色素，根据稳定性要求的不同应用于不同领域。 

2.采用柱层析方法和价格低廉的填料，成本低，适合大量生产，工业化前景好。 

3.使用食用酒精为溶剂和洗脱剂，安全可靠，产品可作为食品添加剂。 

四、附图说明

使用液相色谱-质谱连用技术对本技术方案获得的无酰基花色苷、单酰基花色苷和双酰基花色苷3个组分的主要花色苷成分进行了鉴定，确定了主要花色苷成分的分子量，并参考相关文献确定了主要成分，获得3个组分的HPLC-MS谱图，详见附图。图1：无酰基紫薯花色苷组分HPLC谱图；图1-1：无酰基紫薯花色苷组分1号峰MS图；图1-2无酰基紫薯花色苷组分2号峰MS图；图2单酰基紫薯花色苷组分HPLC谱图；图2-1单酰基紫薯花色苷组分1号峰MS图；图2-2单酰基紫薯花色苷组分2号峰MS图；图2-3单酰基紫薯花色苷组分3号峰MS图；图2-4单酰基紫薯花色苷组分4号峰MS图；图2-5单酰基紫薯花色苷组分5号峰MS图；图2-6单酰基紫薯花色苷组分6号峰MS图；图3双酰基紫薯花色苷组分HPLC谱图；图3-1双酰基紫薯花色苷组分1号峰MS图；图3-2双酰基紫薯花色苷组分2号峰MS图；图3-3双酰基紫薯花色苷组分3号峰MS图；图3-4双酰基紫薯花色苷组分4号峰MS图。 

五、具体实施方式