[发明专利]充分分离植物组织的方法和装置

权利要求书

1.一种用于制备适于组织培养和/或遗传转化的植物胚的方法，包括：

(a)将包括种皮和植物胚的植物种子组织置于水性环境中；

(b)将所述组织与选择性地附着到胚或种皮的试剂接触；和

(c)根据试剂对胚或种皮的选择性附着分离至少第一胚。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述试剂包括气泡。

3.如权利要求2所述的方法，其中，所述气泡具有大约100微米至大约1mm的最大平均尺寸。

4.如权利要求3所述的方法，其中，所述气泡包含选自空气、氧气、氮气及其组合的气体。

5.如权利要求1所述的方法，其中，所述步骤(c)包括根据胚的浮力分离第一胚。

6.如权利要求3所述的方法，包括在所述水性环境中包含减少气泡彼此之间的聚并的表面活性剂。

7.如权利要求6所述的方法，其中，所述表面活性剂选自聚醚、PPG(聚(丙二醇))和PEG(聚(乙二醇))。

8.如权利要求7所述的方法，其中，所述PPG具有大约340至大约3500道尔顿的分子量。

9.如权利要求7所述的方法，其中，所述PEG具有大约100道尔顿至大约9000道尔顿的分子量。

10.如权利要求1所述的方法，其中，所述试剂包括与所述水性环境不混溶的第二液体。

11.如权利要求10所述的方法，其中，所述第二液体选自与胚的存活和转化相容的植物油、矿物油或其它疏水液体。

12.如权利要求1所述的方法，其中，所述植物种子组织包括按照权利要求1所述的方法产生的胚。

13.如权利要求1所述的方法，其中，所述水性环境基本上由包括水和/或具有大约0mOsm/kg至大约600mOsm/kg的摩尔渗透压浓度的渗透剂的培养基组成。

14.如权利要求13所述的方法，其中，所述渗透剂选自甘露醇、山梨醇、葡萄糖和蔗糖。

15.如权利要求14所述的方法，其中，所述培养基基本上由水和浓度为大约0.05M至大约0.5M的甘露醇组成。

16.如权利要求14所述的方法，其中，所述培养基基本上由水和浓度为大约0.05M至大约0.5M的蔗糖组成。

17.如权利要求1所述的方法，包括将植物种子组织置于所述水性环境中而不先分离胚和非胚组织。

18.如权利要求1所述的方法，其中，所述植物种子组织是玉米植物种子组织、棉花植物种子组织或大豆植物种子组织。

19.一种用于制备适于组织培养和/或遗传转化的植物胚组织的装置，包括：

(a)用于保持包括多个植物胚的植物种子组织在水性环境中的容器；和

(b)用于向所述水性环境递送选择性地附着到胚的试剂的至少第一喷嘴，其中，所述喷嘴产生具有大约100微米至大约1mm的平均直径的气泡。

20.如权利要求19所述的装置，其中，所述容器填充培养基和包括胚和非胚组织的植物种子组织。

21.如权利要求19所述的装置，进一步包括用于根据胚在所述水性环境中的浮力分离胚组织的收集器。

22.如权利要求19所述的装置，其中，所述气泡包含选自空气、氧气、氮气及其组合的气体。

23.一种制备适于组织培养和/或遗传转化的植物胚的方法，其中，用于保持籽粒或其它组织的装置在容器中离心，以向籽粒或其它组织施力。

24.一种获得适于组织培养和/或遗传转化的植物胚的装置，包括：

(a)用于将培养基引到玉米粒或含有植物胚的其它组织之上的至少第一流体喷射口；和

(b)用于保持玉米粒或其它组织在培养基的路径中的装置。

25.如权利要求24所述的装置，其中，所述胚包含在玉米粒中。

26.如权利要求25所述的装置，其中，所述玉米粒包含在玉米穗上。