[发明专利]具有抗脂质累积活性的川芎内酯提取物制备方法及用途

说明书

技术领域

 本发明属中药化学领域，具体地说涉及一种从川芎中提取的有效组分及其制备方法，以及该组分在制备非酒精性脂肪肝治疗药物中的应用。

背景技术

肝损伤是由多种病因引起且有多种因素参与的复杂过程。肝损伤引发的肝脏疾病已成为常见病、多发病，更为严重的是其引发的肝功能衰竭和肝性脑病等，发病率和死亡率高，极大地威胁着人类健康。很多因素可引起肝损伤。非酒精性脂肪肝病（nonalcoholic fatty liver disease，NAFLD），又称非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver，NAFL），是一种无过量饮酒史，以肝实质细胞脂肪变性和脂肪贮积为特征的临床病理综合征。非酒精性脂肪肝包含一系列的肝脏疾病，从单一的脂肪变性到不同程度的脂肪变性联合坏死和纤维化。而肝细胞内脂质异常累积则是脂肪肝类疾病发生的最主要因素。油酸是人体内最为丰富的脂肪酸之一，它参与形成肝脏中的三酸甘油酯并能促进脂滴的形成，油酸诱导HepG2脂肪累积是一种常用的脂质累积细胞模型，可用于评价药物的抗脂质累积作用。

目前，非酒精性脂肪肝治疗方法有很多，且均有一定疗效，但也存在着明显的不足。首先，西药具有较大的毒副作用，且疗效并不确切。而另一方面，实验和临床研究证实，中药在改善肝功能、抗氧化、改善微循环、调节免疫功能以及抗肝纤维化等方面显示出良好的疗效，安全、可靠、有效，进一步显示出中医辨证论治的合理性，突显了中药在治疗称非酒精性脂肪肝方面的良好前景。

川芎为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎，其性味辛，温。归肝、胆、心包经。活血祛瘀作用广泛，适宜瘀血阻滞各种病症；祛风止痛，效用甚佳，可治头风头痛、风湿痹痛等症。现代药理学研究表明，川芎提取物对离体豚鼠心脏有剂量依赖性抑制作用，对离休大鼠或豚鼠心脏均具有显著的增加冠脉流量作用，其主要活性成分川芎嗪能扩张大鼠肺血管， 抑制缺氧性肺血管收缩反应和右心室肥大。此外，川芎还具有中枢神经系统抑制作用，对动物大脑的活动具有抑制作用，而对延脑呼吸中枢、血管运动中枢及脊髓反射中枢具有兴奋作用。但目前研究大都集中在川芎嗪和阿魏酸等成分，对于川芎内酯类组分是否具有抑制肝细胞脂质累积的活性尚不清楚。

发明内容

本发明的目的是提供一种川芎有效组分，该有效组分主要含有藁本内酯，含量为30~90%。

本发明的另一目的是提供该川芎有效组分的制备方法，通过以下步骤实现：将川芎药材粉碎后加入20%~90%的乙醇浸泡5~12小时，加热回流提取0.8~1.2小时，提取1~3次，合并滤液得提取液，将提取液用石油醚萃取，将萃取液浓缩后用正相硅胶柱对其进行纯化，以体积比为50:1的石油醚与乙酸乙酯为洗脱剂，收集洗脱液浓缩后得到有效组分。

本发明的再一个目的是提供该川芎有效组分在制备非酒精性脂肪肝治疗药物中的应用。

本发明第一方面提供了一种川芎提取物，其中含有30~90%的藁本内酯。

根据本发明第一方面的川芎提取物，其中含有80~97%(例如85%-95%)的藁本内酯。

根据本发明第一方面的川芎提取物，其是通过以下方法制备得到的：将川芎药材粉碎后，用70%~99%乙醇(例如75%~98%)浸泡并回流提取1-4次，合并提取液，浓缩，用石油醚萃取，将合并的萃取液回收溶剂至干，得石油醚萃取浸膏；取石油醚萃取部分浸膏，加入正相硅胶拌样后过正相硅胶柱，以体积比为50:0.5~5(例如50:0.5~3)的石油醚和乙酸乙酯溶液为洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，浓缩，即得。

根据本发明第一方面的川芎提取物，其是通过以下方法制备得到的：将川芎药材粉碎后加入20%~90%的乙醇浸泡5~12小时，加热回流提取0.8~1.2小时，提取1~3次，合并滤液得提取液，将提取液用石油醚萃取，将萃取液浓缩后用正相硅胶柱对其进行纯化，以体积比为50:1的石油醚与乙酸乙酯为洗脱剂，收集洗脱液浓缩后得到提取物。

根据本发明第一方面的川芎提取物，其是通过以下方法制备得到的：将1000g川芎药材粉碎后，加入4000ml 95%乙醇浸泡过夜，回流提取2小时，再加入4000ml用95%乙醇加热回流提取3次，每次2h，合并提取液，浓缩至密度1.08；将浓缩液加至500ml水中分散成混悬液，加入500ml石油醚萃取3次，合并萃取液，回收溶剂至干。取石油醚萃取部分浸膏，加入正相硅胶拌样后过正相硅胶柱，以体积比为50:1的石油醚和乙酸乙酯溶液为洗脱剂进行洗脱，收集洗脱液，经过浓缩后即得。