[发明专利]一株海洋细菌Pseudoalteromonas issachenkonii HZ及其产生的多糖有效
申请号: | 201210277121.1 | 申请日: | 2012-08-06 |
公开(公告)号: | CN102839138A | 公开(公告)日: | 2012-12-26 |
发明(设计)人: | 郝鲁江;张晓飞 | 申请(专利权)人: | 山东轻工业学院 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12P19/04;C02F3/34;C02F1/56;C02F1/62;C12R1/01 |
代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 杨琪 |
地址: | 250353 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 海洋 细菌 pseudoalteromonas issachenkonii hz 及其 产生 多糖 | ||
1.一株海洋细菌Pseudoalteromonas issachenkonii HZ,其特征在于:该菌株已于2011年12月09日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO:M 2011456。
2.一种多糖,其特征在于:是由培养海洋细菌Pseudoalteromonas issachenkonii HZ所得到的。
3.根据权利要求2所述的一种多糖,其特征在于:是通过以下方法得到的:
(1)培养:海洋细菌Pseudoalteromonas issachenkonii HZ菌株经斜面培养、种子培养后得到种子培养液,接种到发酵培养基中,接种量2%~5%,温度20~35℃,150~250r/min摇床培养30~40h,得发酵液;
(2)提取:发酵液5000rpm/min离心20min,过滤去除菌体,向上清液中加入3倍体积的95%乙醇,静置8~12h,离心得到沉淀,即为蛋白质和多糖的混合物;
(3)除杂蛋白:将上述得到的蛋白质和多糖的混合物溶于水中,加入总体积1/4体积的Sevag溶剂,充分震荡10min,离心去除有机相;重复进行8次,得到粗多糖溶液;
(4)分离纯化:采用DEAE-52对粗多糖进行分级,用0-2M NaCl Tris-HCl进行梯度洗脱,收集主峰;将收集到的主峰浓缩脱盐、冷冻干燥后,溶于0.1MNaCl溶液,用Sephadex G100层析,用0.1M NaCl洗脱,收集第一个洗脱峰,冷冻干燥后即得到多糖。
4.根据权利要求3所述的一种多糖,其特征在于:所述斜面培养所用的斜面培养基为:Zobell2216E培养基:蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸铁0.01g,琼脂20.0g,陈海水1000ml,调ph至7.6~7.8。
5.根据权利要求3所述的一种多糖,其特征在于:所述种子培养所用种子培养基为:Zobell2216E培养基:蛋白胨5.0g,酵母膏1.0g,磷酸铁0.01g,陈海水1000ml,调ph至7.6~7.8。
6.根据权利要求3所述的一种多糖,其特征在于:所述发酵培养基为:牛肉膏0.25%,蔗糖3%,硝酸铵0.00016%,硼酸0.0022%,氯化钙0.18%,磷酸氢二钠0.0008%,柠檬酸铁0.01%,氯化镁0.88%,溴化钾0.008%,氯化钾0.055%,碳酸氢钠0.016%,氯化钠1.945%,硅酸钠0.0004%,硫酸钠0.0324%,氯化锶0.0034%,氟化钠0.00024%,余量为水,pH7.6~7.8;所述百分数均为质量百分数。
7.根据权利要求3所述的一种多糖,其特征在于:所述培养条件为:温度30℃,200r/min摇床培养36h。
8.权利要求1所述的海洋细菌Pseudoalteromonas issachenkonii HZ在污水处理中的应用。
9.根据权利要求3所述的一种多糖在污水处理中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于:所述多糖作为金属离子清除剂、自由基清除剂以及絮凝剂的应用。
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