[发明专利]冬凌草叶水提物的纳米结构及应用

说明书

 

发明领域

本发明涉及冬凌草叶用蒸馏水80 oC提取制备水提物、涉及该水提物浓缩得到的固体在水溶液中的纳米结构、进一步涉及纳米结构对抗骨质疏松活性的影响。本发明属于生物医药领域。 

  

背景技术

冬凌草(DLC)，是唇形科香茶菜属植物碎米桠 Rabdosia rubescens (Hemsl.) Hara 的全草。冬凌草为多年生草本植物，广泛分布于我国黄河长江流域，主产于河南济源太行山、王屋山区一带。因具有清热解毒、清咽利喉和消肿止痛功能， 民间常年将冬凌草叶当作茶叶煮水饮用。在过去的30多年里，冬凌草的化学成分及药理作用研究主要集中在叶的脂溶性部分，代表性成分为冬凌草甲素和冬凌草乙素。通过长期研究积累，发明人披露了冬凌草叶水提物的21种酚酸。它们是单咖啡酰酒石酸, 丹参素, 丹参素咖啡酰酒石酸, 2-绿原酸-3-对羟基桂皮酸酒石酸酯, 单阿魏酰酒石酸, 绿原酸, 咖啡酰苹果酸, 二咖啡酰酒石酸, 迷迭香酰丹参素酒石酸酯, yuannaneic acid E, 紫草酸, 咖啡酸, 咖啡酰对羟基桂皮酰酒石酸, 氢化紫草酸。2-丹参素-3-乙酰莽草酸酒石酸酯, 丹参素咖啡酰酒石酸, 2-(丙二酰奎尼酸单酯)-3-丹参素酒石酸奎尼酸单酯, 水化丹酚酸B, 丹参素酰丹参素酰迷迭香酸酯, 丹酚酸B和迷迭香酸。这些酚酸在冬凌草叶水提物中的相对含量接近83%。应当指出的是，到目前为止还没有任何与冬凌草叶水提物纳米结构的报道。 

通过长期研究积累，发明人认识到这些酚酸在水溶液中可以通过π-π相互作用，氢键相互作用和疏水性相互作用发生共组装，形成纳米结构。恰恰是这些酚酸在水溶液中共组装形成的纳米结构，使得冬凌草叶水提物显示重要的生物活性。根据这些认识，发明人提出了本发明。 

发明内容

本发明的第一个内容是提供冬凌草叶水提物。 

本发明的第二个内容是测定冬凌草叶水提物的纳米结构。 

本发明的第三个内容是阐明冬凌草叶水提物的纳米结构与抗骨质疏松活性的关系。

  

附图说明

图1在浓度为 78.75 mg/ml的超纯水溶液中，冬凌草叶的水提物以直径为102.3 nm的纳米球的聚集体存在。 

图2在浓度为 15.75 mg/ml的超纯水溶液中冬凌草茎的水提物以直径为46.4-110.7 nm的纳米球存在。 

图3在浓度为 3.15 mg/ml的超纯水溶液中冬凌草茎的水提物以直径为58.8-147.1 nm的纳米球存在。 

图4在浓度为 0.63 mg/ml的超纯水溶液中冬凌草叶的水提物以直径为81.8-218.2 nm的纳米球存在。 

  

具体实施方式

为了进一步阐述本发明,下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的,它们仅用来对本发明进行具体描述,不应当理解为对本发明的限制。 

实施例1 冬凌草叶水提物的制备

21 g干冬凌草叶自来水洗净之后加500 ml双蒸水于60 - 100 oC, 优选80 oC搅拌提取10 - 60分钟, 优选30分钟。过滤得到的清液于40 oC减压浓缩, 得到6.3 g 冬凌草叶水提物, 为淡黄色固体, 研成粉末, 供后面的研究使用。

实施例2 冬凌草叶水提物的纳米结构

为了描述冬凌草叶水提物的纳米结构，本发明将冬凌草叶水提物的淡黄色固体配成浓度为 78.75 mg/ml, 15.75 mg/ml, 3.15 mg/ml 和 0.63 mg/ml的超纯水溶液，然后将溶液滴在铜网上，35 °C挥发 24 h至干溶后按标准操作(20 eV 能量窗口，6000 - 400,000倍) 在透射电镜 (JSM- 6360 LV, JEOL, Tokyo, Japan)下观察纳米形态。测定的透射电镜照片显示在图1 – 4中。

图1说明在浓度为 78.75 mg/ml的超纯水溶液中，冬凌草叶的水提物以直径为102.3 nm的纳米球的聚集体存在。 

图2说明在浓度为 15.75 mg/ml的超纯水溶液中，冬凌草叶的水提物以直径为46.4-110.7 nm的纳米球存在。