[发明专利]一种肌氨肽苷提取物及其组合物

说明书

技术领域

本发明涉及医药领域，具体的说，涉及一种肌氨肽苷提取物及其组合物。

背景技术

肌氨肽苷是以哺乳动物心肌为原料，采用现代生物技术提取制成的含有多种血管活性物质的药物，主要成分有心房肽、降钙素基因相关肽、腺苷等。其含有大量的多肽、氨基酸、核苷及核苷酸等成分。心房肽具有较强的利钠、利尿、舒张血管平滑肌和抑制肾素-血管紧张素-醛固酮系统的作用。而降钙素基因相关肽是目前已知的体内最强的舒血管活性肽，是由降钙素基因表达和产生的一种37个氨基酸组成的生物活性多肽，可强烈地扩张血管，具有增加冠脉血流量、增强心肌收缩力、保护缺血心肌等作用。肌氨肽苷可用于治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病、心绞痛、心力衰竭、脑血管疾病、高血压等，作为一种极具潜力的心脑血管药物，临床应用十分广泛。

中国专利CN1522757公开了一种肌氨肽苷制备方法。其包括如下步骤：取家兔心肌和肌肉，在5-15℃下，将心肌和肌肉用纯水冲洗至无血色，绞碎；然后加入注射用水匀浆，在-18~22℃冻结20~30小时，再共冻融4~7次；融化后粗滤，滤液加热至80~85℃保持5~8分钟，迅速降温至室温，离心，上清液用微孔滤膜过滤，滤液用超滤膜超滤，既得肌氨肽苷溶液。

中国专利CN1824294的方法为，将兔子心肌和肌肉去除结缔组织后，按0.78-0.82：1与注射用水混合，用告诉组织捣碎机匀浆，放入-20℃冰柜冷冻30~50小时，室温下融化，重复1~3次，最后一次融化的组织液于恒温水浴中55℃保持3~4小时，调pH值为7，加入按组织液于重量1~3g/升的活性碳，煮沸后低温下3000rpm离心30min；上清液调pH值为5.5~6.0，于室温中加入1.5-2g升壳聚糖寡糖，然后调pH值为7.2，用0.22μm微孔滤膜过滤，1万分子量超滤膜超滤得肌氨肽苷溶液。

为了提高多肽、次黄嘌呤等成分的提取率，现有技术无一例外的采用了较高温度。但是这种高温提取无疑会破坏其中的有效成分。使得有效成分含量始终难以有显著的提升。

发明内容

本发明第一目的在于提供一种肌氨肽苷提取物，本发明的提取物的制备方法避免了高温对肌氨肽苷有效成分的破坏；

本发明第二目的在于提供含有所述肌氨肽苷提取物的肌氨肽苷组合物，本发明提供的肌氨肽苷组合物有效成分含量高。

为了实现上述的发明目的，本发明采取了如下的技术方案：

首先，本发明提供了一种肌氨肽苷的提取物，所述提取物的制备方法包括如下步骤：

（1）二氧化碳饱和：取兔子心脏和肌肉，去除脂肪，分别匀浆，然后再分别抽真空至5~10Pa，保持压力20~30min，然后分别通入二氧化碳，至压力为15~20MPa，保持压力20~30min，再抽真充气反复2次；

（2）冻融：在转速700~900rpm下，将二氧化碳饱和的兔子心脏和肌肉浆分别缓慢加入到体积分别为兔子心脏和肌肉重量10~15倍的液体二氧化碳中，加入时间为30~40min，加毕，搅拌2h，降温至-80℃，保持6~10h，然后5~10min将温度升温至40~50℃，将二氧化碳气化；

（3）酶解：按照重量比1：3分别取冻融后的兔子心脏和肌肉，分别加入2倍重量的注射用水中，搅拌均匀，分别得心脏组织溶液和肌肉组织溶液，将心脏组织溶液加入重量0.5~1%的弹性蛋白酶，30~40℃下水解0.5~1h；将肌肉组织溶液加入重量1.2~1.8%的木瓜蛋白酶，40~45℃下水解0.5~1h；

（4）后处理：合并酶解后的心脏组织溶液和肌肉组织溶液，离心，取上清液，加入0.3倍重量的活性碳，室温下搅拌30min，用0.22~0.30μm微孔滤膜过滤既得。

常规方法提取无法避免高温的使用，如果采用较高温度，则对活性成分破坏严重；如果采用较低温度，提取效率又很差。本发明利用干冰升华导致的体积迅速膨胀，可以有效破坏细胞结构，使得细胞内有效成分提取率得以显著提升。而干冰的低温又使得有效成分得以最大程度的保留。

本发明通过抽真空、通入二氧化碳反复多次，可以使得细胞内二氧化碳达到饱和，并最大限度的排除水分，减少了水分和其他气体对于提取的干扰。

本发明经过反复研究，发现兔子心脏和肌肉采用不同方法提取，可以更有效地提取出有效成分。

根据本发明所述的肌氨肽苷的提取物，优选所述方法包括如下步骤：

（1）二氧化碳饱和：取兔子心脏和肌肉，去除脂肪，分别匀浆，然后再分别抽真空至8Pa，保持压力25min，然后分别通入二氧化碳，至压力为18MPa，保持压力25min，再抽真充气反复2次；