[发明专利]食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种肝脏活体穿刺的方法，特别是涉及一种食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法。

背景技术

食蟹猴（M.fascicularis）因其基因与人类高度近似，随着医学研究的发展，食蟹猴已作为一种国际上公认的实验动物，被广泛的应用于医药研发试验。

肝穿刺活组织检查（肝穿刺）是一种能直接了解组织的病理变化，做出较精确诊断检查方法，也是肝脏疾病分类的重要依据，因而肝活检极其重要。肝组织活检的穿刺方法有多种，如一般肝穿刺术、套管针穿刺术、分叶针切取术、快速肝穿刺术等。经肝穿刺，可以有利于多种肝病的鉴别诊断，了解肝脏病变的程度和活动性，提供各型病毒性肝炎的病原学诊断，发现早期、静止或尚在代偿期的肝硬化肝硬化，有利于药物的选择和药物的疗效判断，鉴别黄疸的性质和原因，作为慢性肝炎病情、预后的评判指标，可以进行诊断性治疗等。

然而，在食蟹猴实验过程中，经常遇到使用穿刺方法重复采集肝脏样品。目前国内尚没有关于食蟹猴肝脏穿刺方法的相关报道。然而，国外虽然有食蟹猴肝脏穿刺术的相关报道，但该方法采用穿刺针经皮直接穿刺采集肝脏样品，该方法单次采集样品量少，多次采集易造成食蟹猴肝脏严重损伤，易伤及大血管、胆囊或者其他脏器，动物存活率较低，影响试验的准确性。

因此，需开发出一种有效提高单次肝脏样品采集量，并且能提高动物的存活率的食蟹猴肝脏活体穿刺的方法。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法。该方法能提高单次肝脏样品采样量，同时提高单只动物的肝脏样品采集总量，以及提高实验动物的存活率。

为解决上述技术问题，本发明的食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法，包括步骤：

1）镇静状态下的食蟹猴准备；

2）穿刺针准备；

3）B超准备；

4）经B超引导，进行食蟹猴肝脏活体穿刺采样。

所述步骤1）中，采用氯胺酮镇静食蟹猴，其具体步骤包括：按照5～10mg/kg的剂量，肌肉注射氯胺酮，对食蟹猴进行镇静；镇静后，将食蟹猴采取仰卧位，保定，剃去锁骨以下脐孔以上胸腹部的被毛，并使用碘伏消毒，然后用75%消毒酒精脱碘。

所述步骤2）中，穿刺针为18G的肝脏穿刺针或半自动的穿刺针。当使用半自动的穿刺针时，采样过程中可以通过连续两次按穿刺针尾部的扳机按钮，快速进针，方便快捷的采集到肝脏样品。

所述步骤4）中，采样的步骤包括：在食蟹猴肋骨边缘位置涂上B超耦合剂，选择合适的角度，探明肝脏及各肝小叶的具体位置，同时注意胆囊及血管（如大血管）的具体位置；将参照B超屏幕上的超声图像，沿肋骨边缘下针，穿透皮肤，将穿刺针抵到肝脏表面，按一次穿刺针尾部的扳机按钮，针头迅速穿入肝脏约2～3厘米，再次按穿刺针的扳机按钮，穿刺针的套管顺着针头迅速打出，肝脏样品便采集到针头的凹槽中，然后拔出穿刺针，用干棉球按住皮肤上采样位置进行止血，至少3分钟。

步骤4）中，采样时，避开在同一个肝叶的同一个采样位点，单个动物能连续或者间断采集6次肝脏样品。

上述方法，还包括：5）采样后的样品保存。如将采样后的样品保存至超低温冰箱（-70℃）或者液氮中。

本发明的有益效果如下;

1、采用B超引导，可以明确肝脏的位置及下针的位置和角度，可以有效提高单次肝脏样品采集量，单次肝脏样品采集量可提高至20mg以上；

2、在B超引导下，减小动物损伤，可以增加单只动物的采样次数，单个动物肝脏活体采集的次数可提高至6次，极大的提高了个体动物的样品采集量；

3、可以有效避开大的血管、胆囊和其他脏器，防止导致动物出现大出血或者损伤到其他脏器，极大提高了动物的存活率。

附图说明

下面结合附图与具体实施方式对本发明作进一步详细的说明：

图1是食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的示意图。

具体实施方式

本发明的食蟹猴B超引导下肝脏活体穿刺的方法，包括步骤：

1）镇静状态下的食蟹猴准备

选择一只食蟹猴，使用氯胺酮，按照5～10mg/kg的剂量，肌肉注射，对食蟹猴进行镇静；

待食蟹猴安静（镇静）后，从笼中取出食蟹猴，放在台面上，采取仰卧位，助手保定食蟹猴，剃去食蟹猴锁骨以下脐孔以上胸腹部的被毛，并使用碘伏消毒，然后用75%消毒酒精脱碘。

2）穿刺针准备