[发明专利]膨胀溶剂体系提取装置及利用其分离蟾蜍蛆虫蛋白质的工艺

说明书

技术领域

本发明涉及一种膨胀溶剂体系提取装置及蛋白质分离工艺，特别是一种膨胀溶剂体系提取装置及利用其分离蟾蜍蛆虫蛋白质的工艺。

背景技术

蛋白质是构成生物体的最重要的有机含氮化合物，是生命的物质基础。蛋白质是由20种氨基酸结合成的生物高分子，一般由100个以上氨基酸组成，氨基酸按照不同的比例和排列顺序连接在一起，构成了繁多的蛋白质种类，各种不同的蛋白质不仅成分不同，分子的立体结构、理化特性和生理生化功能都呈现不同的特性。分离蛋白质正是依据上述差异进行的。

CN102091318A（201110007300.9）公开了蟾蜍蛆虫分离蟾肽抗生素及其抗菌药品制备方法。以蟾蜍蛆虫为原料，采用水溶剂萃取法或稀碱溶液萃取法或稀醇溶液萃取法，结合离子交换树脂吸附法、超滤及微滤、凝胶色谱、超声驻波液相制备色谱等工艺中的一种或者多种工艺纯化，再真空冷冻干燥制备成蟾肽抗生素。

 CN101991608A （201010551771.1）公开了蝇蛆提取物及其制备方法和用途，其主要成分是水溶性蛋白质，分子量为2～16Kpa。

CN101288436（200810111136.4 ）公开了一种用无菌蝇蛆制备昆虫蛋白粉的方法及应用，作为无菌蝇蛆，经压滤、分解、过滤、调酸度、沉淀、水洗、干燥而制成昆虫动物蛋白质。

张爱君等人研究了稀碱法提取食用蝇蛆蛋白，其液料比、浸提取温度、碱浓度对提取得率有显著影响。

ZL200410013742.4 公开了采用中药蟾蜍蛆虫的方法，可以大批量工业化生产蟾蜍蛆虫。

常用提取分离蛋白质工艺有缓冲溶液提取法、生理盐水提取法、稀碱溶液提取法，提取之后再利用溶解度的差异分离纯化，利用分子大小和形状的差异分离纯化及利用电荷性质的差异分离纯化。由于蟾蜍蛆虫蛋白质是一种珍贵的蛋白质，保证蛆虫蛋白质提取效率和产量都需要特殊的工艺条件才能达到最佳效果。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种膨胀溶剂体系提取装置及利用其分离蟾蜍蛆虫蛋白质的工艺，提取分离纯化的蟾蜍蛆虫蛋白质含量达91.8～93.5%，而且提取效率高。

本发明的膨胀溶剂体系提取装置由球形膨胀溶剂体系提取器、原料罐、固液分离器、气固分离器、成品罐、外源二氧化碳瓶、二氧化碳储罐、二氧化碳循环压力泵和溶剂罐组成，球形膨胀溶剂体系提取器通过管线分别与原料罐、固液分离器、二氧化碳循环压力泵及溶剂罐相连接，固液分离器与气固分离器相连接，气固分离器通过管线分别与成品罐及二氧化碳储罐 相连接，二氧化碳储罐通过管线分别与外源二氧化碳瓶及二氧化碳循环压力泵连接。

本发明按照以下技术方案分离蟾蜍蛆虫蛋白质：

（1）将1000g蟾蜍蛆虫装入常温膨化装置中，加压至1～8Mpa，时间10～60min，然后迅速释放压力至常压，蟾蜍蛆虫被膨化；

（2）膨化后的蟾蜍蛆虫粉体加入到膨胀溶剂体系提取装置中，加入膨胀溶剂，加压至2～10Mpa形成膨胀溶剂体系，在10～25℃提取10～60min，蟾蜍蛆虫蛋白质溶解，然后降压至常压，得到蟾蜍蛆虫蛋白质粗品；

（3）将1000g蟾蜍蛆虫蛋白质粗品加入10～50Kg纯净水搅拌均匀后，泵入膜孔径0.5～10μm的微滤机微滤处理，微滤后溶液泵入膜孔径5～120nm的超滤机超滤处理；

（4）将经过微滤和超滤处理后的物料溶解在溶剂体系中，泵入超声驻波液相制备色谱中，超声驻波功率0.1～5.0KW，频率500～1000kHz，流速50～1000mL/min，紫外检测器波长280nm，连续纯化分离出蟾蜍蛆虫蛋白质；

（5）将分离纯化的蟾蜍蛆虫蛋白质在温度-30～30℃、真空度10～500Kpa的条件下真空冷冻干燥2～24h，物料水分含量5～8%时得成品。

本发明在分离蛋白质时，采用常温膨化粉碎，无水低温膨胀溶剂体系提取，切向流微滤或超滤，无固体固定相超声驻波液相制备色谱纯化等工艺，提取分离纯化的蟾蜍蛆虫蛋白质含量达91.8～93.5%。本工艺提取成份明确，一致性好，质量可控，工艺过程简单，提取效率高，易于工业化生产，而且节能，没有环境污染。

附图说明

图1为膨胀溶剂体系提取装置的结构示意图。

具体实施方式

具体实施方式一：本实施方式按照下述方法分离蟾蜍蛆虫蛋白：