[发明专利]与小麦千粒重和粒长主效QTL紧密连锁的分子标记及其获取方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及小麦分子生物技术与育种应用领域，具体地说是一种与增加小麦千粒重和粒长主效QTL紧密连锁的分子标记及其获取方法和应用。

背景技术

小麦是世界上最重要的粮食作物之一，因此高产小麦品种的选育一直被育种家高度重视。小麦产量性状是复杂的数量性状，受多个数量性状基因位点（Quantitative trait locus，QTL）控制，具有遗传力低、受环境影响大、选择难度高的特性，所以在选育高产小麦品种时，传统的育种方法常存在时间长、耗费大、成本高、成果小的问题。分子标记辅助育种是一种采用与特定性状相关联的分子标记作为辅助手段进行育种的有效方法，具有不受环境条件限制、在植物发育的各个组织和生育时期均可检测、选择效率高的优势。研究证明，主要受籽粒大小性状影响的千粒重是最稳定的产量直接构成因素（Giura and Saulescu, Euphytica. 89: 77-80, 1996）；Snape等曾报道过籽粒大小与产量高度相关（Euphytica. 154: 401-408, 2007）。可见，小麦的产量与籽粒大小和千粒重具有显著相关性。因此，研究千粒重和籽粒大小基因，通过分子标记技术，提高小麦籽粒大小和千粒重获得高产小麦新品种，在育种工作中具有极其重要的意义。小麦山农品系0431是1994年“国际冬春麦杂交筛选圃”（美国，康奈尔大学）的F₃组合“Grtpi85504 // MI76-77-S29 / ALD”选育的的一个大粒、抗病（条纹病、叶锈病、白粉病、根腐病）和抗干热风的品系，综合农艺性状好，是研究千粒重和籽粒大小基因的优异种质资源。目前，尚未有与其千粒重和粒长主效数量基因位点QTL相连锁的分子标记报道。

发明内容

本发明的目的就是提供一种与小麦千粒重和粒长主效QTL紧密连锁的分子标记及其获取方法和应用，通过发明获得的与千粒重和粒长主效QTL紧密连锁的分子标记，来检测小麦品种或品系中是否具有增加千粒重和粒长的QTL，以加快小麦高产品种的选育进程。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

本发明所提供的一种与小麦千粒重和粒长主效QTL紧密连锁的分子标记，该分子标记为wmc386和barc216，其所述分子标记wmc386的引物左端核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述、右端核苷酸序列如SEQ ID NO:2所述；所述分子标记barc216的引物左端核苷酸序列如SEQ ID NO:3所述、右端核苷酸序列如SEQ ID NO:4所述。

一种与小麦千粒重和粒长主效QTL紧密连锁的分子标记的获取方法，它包括以下步骤：采用分子标记wmc386的引物

左端核苷酸序列  ATCACTGAAACGAAATGAGCGG（如SEQ ID NO:1所述）

右端核苷酸序列  TGGTTGGCGGTTTTTCTCTACA（如SEQ ID NO:2所述）

和分子标记barc216的引物

左端核苷酸序列  TGACGACCCAATCCATAGACA （如SEQ ID NO:3所述）、

右端核苷酸序列  GGTGATTATTCGTGAGTTCCCTGTG（如SEQ ID NO:4所述）

对小麦品系山农0431的DNA分别进行PCR扩增，其PCR扩增体系为20 μl，H₂O 5.75 μl，10×PCR缓冲液 10.0 μl，Taq酶 0.25 μl，左右端引物 2.0 μl，DNA 2.0 μl；扩增条件为94℃预变性4 min；94℃变性40 s，55℃退火45 s，72℃延伸50 s，35个循环；72℃延伸10 min；10℃保存；扩增产物分别在8%聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离后，获得的扩增产物的分子量分别为190 bp和100 bp，即得到与小麦千粒重和粒长主效QTL连锁的分子标记。

本发明所述的与小麦千粒重和粒长主效QTL紧密连锁的分子标记在选育高产小麦中的应用，即为将与小麦千粒重和粒长主效QTL紧密连锁的分子标记用于检测小麦品种或品系的方法，该方法它包括以下步骤：