[发明专利]一种利用家蚕生物反应器生产猪瘟病毒亚单位疫苗的方法

权利要求书

1.一种猪瘟病毒重组E2蛋白，其特征在于，所述猪瘟病毒重组E2蛋白具有与SEQ ID NO1.序列至少70％同源性的序列。

2.根据权利要求1所述的猪瘟病毒重组E2蛋白，其特征在于，所述猪瘟病毒重组E2蛋白的序列为SEQ ID NO1.序列。

3.一种猪瘟病毒重组E2蛋白，其特征在于，所述猪瘟病毒重组E2蛋白具有与SEQ ID NO2.序列至少70％同源性的序列。

4.根据权利要求1所述的猪瘟病毒重组E2蛋白，其特征在于，所述猪瘟病毒重组E2蛋白的序列为SEQ ID NO2.序列。

5.一种利用家蚕生物反应器生产猪瘟病毒重组E2蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)克隆猪瘟病毒重组E2蛋白的编码基因序列，至昆虫核型多角体病毒(AcNPV)的表达转移载体pFastBacI上，获得重组表达转移载体；

2)将重组表达转移载体转化入含有杆状病毒载体的大肠杆菌感受态细胞DH10Bac中，获得含有猪瘟病毒E2基因的重组杆状病毒基因组穿梭载体；

3)将上述重组杆状病毒基因组穿梭载体转染入昆虫细胞中，获得带该猪瘟病毒E2基因的重组昆虫核型多角体病毒；

4)将上述重组昆虫核型多角体病毒经皮下注射家蚕幼虫或蛹，在体内表达猪瘟病毒重组E2蛋白。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述猪瘟病毒重组E2蛋白的编码基因序列为具有与SEQ ID NO.3至少70％同源性的序列。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述猪瘟病毒重组E2蛋白的编码基因序列为SEQ ID NO.3序列。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述猪瘟病毒重组E2蛋白的编码基因序列为与SEQ ID NO.4至少70％同源性的序列。

9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述猪瘟病毒重组E2蛋白的编码基因序列为SEQ ID NO.4序列。

10.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述家蚕幼虫或蛹的品种为大造。

11.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述昆虫细胞为sf9、sf21、High Five等昆虫细胞。

12.一种由权利要求1-4任意一种所述的猪瘟病毒重组E2蛋白制备的猪瘟病毒亚单位疫苗。

13.一种猪瘟病毒亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，使用权利要求1-4任意一种所述的猪瘟病毒重组E2蛋白，加入疫苗佐剂，获得猪瘟病毒亚单位疫苗。

14.一种如权利要求1-4任意一种所述的猪瘟病毒重组E2蛋白在制备治疗或预防猪瘟的抗原中的应用。

15.一种如权利要求1-4任意一种所述的猪瘟病毒重组E2蛋白在制备猪瘟诊断试剂中的应用。