[发明专利]一种中间普氏菌培养基

说明书

技术领域

本发明涉及检验口腔微生物培养领域，具体涉及一种中间普氏菌培养基。

背景技术

牙周病是常见的口腔疾病，在世界范围内有很高的发病率。中间普氏菌（Prevotella intermedia，Pi）属产黑色素类的G-厌氧杆菌，大量的研究显示Pi与牙周炎、根尖周病和冠周炎等感染性疾病关系密切。目前的Pi检验手段主要是龈下菌斑采样进行聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR），该种方法需要对样本进行DNA提取和PCR引物设计，且需要配备PCR相关仪器设备，成本昂贵，操作复杂。微生物培养是一种用人工方法使微生物生长繁殖的技术，而选择性培养基是用来促进或抑制一定类型的生物体（如细胞或细菌等）而设计的培养基，利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来。非选择性厌氧菌基础培养基培养牙垢标本，很难将厌氧链球菌、牙龈卟啉菌、梭菌属等分离出去，影响中间普氏菌的生长。

发明内容

本发明的技术任务是针对以上现有技术的不足，提供一种适合于中间普氏菌生长的培养基。

本发明解决其技术问题的技术方案是：一种中间普氏菌培养基，其特征在，配制1000ml培养基的配方中含有：蛋白胨15g；牛心浸粉8g；氯化血红素5mg；维生素K1 10mg；氯化钠5.5g；琼脂15g；多西环素4mg；甲硝唑20mg；无菌绵羊血90ml；蒸馏水加至1000ml。

优化方案中，每1000ml培养基还含有杆菌肽锌2mg。

优化方案中，每1000ml培养基还含有L-谷氨酰胺0.1g。

优化方案中，每1000ml培养基还含有胆盐1.8g。

优化方案中，每1000ml培养基还含有浓度200g/L的射干水煮液200ml。

其中所述的蛋白胨提供碳氮源和能量；牛心浸粉含有各种多肽、脂肪、生长因子、激素等，这些物质对促进中间普氏菌的繁殖和生长都是很重要的因素；氯化血红素和维生素K1为厌氧菌营养剂；氯化钠维持均衡的渗透压，且由于中间普氏菌较其他的口腔厌氧菌更为耐受高盐环境，所以高氯化钠水平还有利于抑制其他口腔厌氧菌生长；琼脂是培养基的凝固剂；多西环素可以有效的抑制链球菌等革兰氏阳性菌、放线菌属、炭疽杆菌、李斯特菌、梭状芽孢杆菌、奴卡菌属、弧菌、布鲁菌属、弯曲杆菌、耶尔森菌、放线放线杆菌、黄褐色嗜二氧化碳菌；既往研究表明，甲硝唑抑制牙龈卟啉菌能力64倍于中间普氏菌；无菌绵羊血提供能量环境；杆菌肽锌可以广谱抑制革兰氏的阳性菌和阴性球菌、肺炎双球菌、葡萄球菌、淋球菌、脑膜炎双球菌及螺旋体；L-谷氨酰胺属氨基酸类，为营养剂；胆盐抑制革兰氏阳性菌，特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌；射干为鸢尾科植物射干的干燥根茎，现代研究表明，射干煎剂或浸剂，在试管中对常见的致病性皮肤癣菌有抑制作用；在体外对外感及咽喉疾患中的某些病毒，也有抑制或延缓作用。

本发明与现有技术相比较，具有检出可靠、中间普氏菌分离率高的特点。

具体实施方式

以下结合实际情况，对本发明的具体实施方式作详细说明。

实施例1，配制1000ml培养基的配方中含有：蛋白胨15g；牛心浸粉8g；氯化血红素5mg；维生素K1 10mg；氯化钠5.5g；琼脂15g；多西环素4mg；甲硝唑20mg；无菌绵羊血90ml；蒸馏水加至1000ml。制备方法为称取蛋白胨、牛心浸粉、氯化钠；琼脂；多西环素；甲硝唑混匀，蒸馏水溶解，210℃灭菌15 min，冷却到45℃，加入无菌绵羊血、灭菌氯化血红素、灭菌维生素K1，混匀后灭菌蒸馏水定容到1000ml后分装。

实施例2，配制1000ml培养基的配方中含有：蛋白胨15g；牛心浸粉8g；氯化血红素5mg；维生素K1 10mg；氯化钠5.5g；琼脂15g；多西环素4mg；甲硝唑20mg；无菌绵羊血90ml；杆菌肽锌2mg；蒸馏水加至1000ml。制备方法为称取蛋白胨、牛心浸粉、氯化钠；琼脂；多西环素；甲硝唑；杆菌肽锌混匀，蒸馏水溶解，210℃灭菌15 min，冷却到45℃，加入无菌绵羊血、灭菌氯化血红素、灭菌维生素K1，混匀后灭菌蒸馏水定容到1000ml后分装。