[发明专利]燕窝胶体金免疫试纸条及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及燕窝及其相关产品的检测，尤其涉及一种燕窝胶体金免疫试纸条及其制备方法。

背景技术

燕窝是由雨燕科金丝燕及同属类的唾液或者绒羽等混唾液凝结而成的巢窝，其产地分布于东南亚一带，如中国、印尼、泰国、越南和马来西亚等。燕窝是一种名贵中药，具有养阴润燥，补中益气，入胃补脾，化痰止咳等功能；燕窝含有丰富的活性糖蛋白，钙、铁、磷、碘及维生素等天然营养物和矿物质，还具有的防止流感病毒，促进细胞生长和加强免疫系统功能等作用。由于燕窝的营养价值和经济价值均较高，而且消费者对其需求日益增长，因此一些商贩通过染色、漂白，或以银耳、猪皮、琼脂、果胶等掺假伪造。假冒伪劣的燕窝及其制品频繁被曝光，而检测燕窝及其相关产品的标准方法尚属空白，因此，为保障消费者的合法权益和生命健康，完善市场秩序，完善燕窝及其相关产品的检测方法迫在眉睫。

现有的燕窝及其相关产品检测方法主要有：

（1）PCR方法：利用燕窝中特定基因片段进行PCR检测，该方法特异性好，但检测时间长，需要昂贵的设备和专业的操作人员，且燕窝制成品往往需要热加工，容易导致样品中DNA降解，从而使检测结果出现假阴性；

（2）电泳方法：基于燕窝蛋白质图谱进行分析，但抗基质干扰能力差，灵敏度低，仅限于对燕盏进行检测，无法用于燕窝制成品的检测；

（3）特定组份分析法：利用色谱、光谱等手段，通过分析燕窝中各种化学组份如特定元素、氨基酸、唾液酸、糖类等的含量鉴定其真假，但其特异性不高，易于被人为添加物干扰。

因此，现有的检测技术存在特异性不强，容易受人为添加物的干扰，适用范围窄，无法对燕窝含量不高、需高温加工且基质干扰较大的燕窝制成品进行有效的检测，检测操作繁琐，检测时间长，需要配备大型分析仪器且要求专业的操作人员等缺点。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，发明人预料不到地发现，通过提取唾液酸糖蛋白作为抗原，制备高度特异的抗燕窝唾液酸糖蛋白抗体，构建的胶体金免疫试纸条可广泛应用于燕窝及其相关产品的检测，无需使用分析设备，可实现燕窝及其相关产品的现场快速鉴别，且具有特异性好，灵敏度高，抗基质干扰效果好，操作简单、快捷，检测成本低等优点。

本发明提供一种燕窝胶体金免疫试纸条，包括样品垫、结合垫、反应垫、吸水垫和PVC背衬，所述PVC背衬上依次粘附有样品垫、结合垫、反应垫和吸水垫；所述结合垫粘附于所述样品垫之上，并与所述反应垫相搭接；所述反应垫与所述吸水垫相搭接；所述结合垫包被有抗唾液酸糖蛋白抗体胶体金标记物，所述反应垫分别包被有唾液酸糖蛋白抗原构成的检测线和羊抗鼠IgG构成的质控线。

采用上述技术方案，可对燕窝及其相关产品进行的定性检测，无需使用分析设备，根据肉眼分辨检测条带出现与否即可得出检测结果，可实现燕窝及其相关产品的现场快速鉴别，特异性好，灵敏度高，抗基质干扰效果好，操作简单、快捷，检测成本低。

作为本发明的进一步改进，所述反应垫采用硝酸纤维素膜，作为C/T线的承载体，也是免疫反应的发生处。

作为本发明的进一步改进，所述结合垫采用玻璃纤维素膜，有利于燕窝胶体金免疫试纸条性能的优化。

作为本发明的进一步改进，所述样品垫设置有样品孔，将样品检测溶液加入样品孔中，可减少样品检测溶液的扩散浪费。

作为本发明的进一步改进，所述检测线与所述质控线的距离为5mm~10mm，有利于检测结果的快速鉴别。

本发明还提供燕窝胶体金免疫试纸条的制备方法，包括如下步骤：

A）  燕窝唾液酸糖蛋白的分离和纯化；

B） 抗唾液酸糖蛋白抗体的制备和纯化；

C） 胶体金的制备；

D） 抗唾液酸糖蛋白抗体胶体金标记物的制备；

E） 结合垫的制备；

F）  反应垫的制备；

G）  样品垫的处理；

H）  燕窝胶体金免疫试纸条的组装。

作为本发明的进一步改进，所述反应垫采用硝酸纤维素膜，来源广泛。

作为本发明的进一步改进，所述结合垫采用玻璃纤维素膜，来源广泛。