[发明专利]一种用于小麦条锈病抗病新基因Yr50辅助选择的分子标记及其用法

权利要求书

1.种用于小麦条锈病抗病新基因Yr50辅助选择的分子标记，其特征在于扩增该分子标记的引物具有如下所示的核苷酸序列：

标记Xbarc1096:

上游：5'-GCGTTCGCATATACGTCGTATACAT-3'，

下游：5'-GGTGGTGAAGAGGCATGCCCAACAAA-3'

或标记Xwmc310:

上游：5'-TGTGAGGCTGGGAGGAAAAGAG-3'，

下游：5'-GCTAGGTTGTGTCCCACAATGC-3'。

2.根据权利要求1所述的用于小麦条锈病抗病新基因Yr50辅助选择的分子标记，其特征在于所述标记Xbarc1096与小麦条锈病抗性基因Yr50的遗传距离为6.9 cM，标记Xwmc310与Yr50的遗传距离为7.2 cM。

3.一种权利要求1所述的用于小麦条锈病抗病基因Yr50辅助选择的分子标记的用法，其特征在于将所述的分子标记用于SSR标记筛选时的反应程序为：

(1) PCR反应体系为：20 μL，含10× buffer2 μL、2 mM dNTP、0.25 μM分子标记引物、1U TaqDNA聚合酶、100 ng基因组DNA, 去离子水补足至20 μL，其中10× buffer2 μL为10 mM Tris–HCl，pH 8.3，50 mM KCl， 1.5 mM MgCl₂；

(2) 扩增程序为:94 ℃预变性5min；94 ℃变性45s，Xwmc310在51 ℃或Xbarc1096在52 ℃复性45s，72 ℃延伸1min，35个循环；72 ℃延伸10min，4 ℃保存；

⑶ 电泳为8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，将4 μL PCR产物和4 μL上样缓冲液混合点样，150V电泳2h，硝酸银染色拍照。