[发明专利]一种检测高度近视的试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种检测高度近视的试剂盒，具体地说检测与高度近视疾病相关ZNF644基因变异的试剂盒。

背景技术

高度近视(high myopia，HM)又称为病理性近视、恶性近视，是指屈光度在-6.00D以上的近视，有眼轴延长、眼后极部的变形改变，巩膜变薄、脉络膜萎缩变薄等病理性改变，并伴有弱视、青光眼、白内障、玻璃体混浊、视网膜脱离等多种并发症。

高度近视是一种致盲性眼病，其病因、发病机制非常复杂。高度近视有家族性并有明显的遗传倾向，且患病率高，有种族差异。在我国，高度近视是常染色体隐性遗传，表现为儿童学龄(前)期出现近视，近视度数进行性增加，眼底视网膜脉络膜病变逐年加重。

到目前为止，对高度近视的治疗方法很有限且效果不显著。光学矫正如戴眼镜或接触镜矫正近视眼的屈光缺陷，虽然有助于暂时恢复正常或接近正常的视力，却不能有效地控制近视进展；针对部分高度近视伴有黄斑病变所采用的玻璃体手术与激光治疗，以及通过手术控制眼轴延长延缓眼底病变出现的时间并减轻其病变程度，是临床上最常采用的干预方法，这些治疗手段能使术后视力提高或保持稳定，屈光度稳定或减少，眼轴增长趋于缓慢，对功能性改变有轻度改善作用，但这些治疗并不能对所有患者有效，且手术存在一定的风险性，手术并发症主要有术后视网膜脱离和涡静脉、睫状动脉损伤，其远期效果也还尚待考证。另外有报道通过药物控制眼轴增长和高度近视的病理改变，但仍处于实验阶段，还有待进一步研究。

因此，早期诊断发现，及早干预，延缓病程，减少病人的视力丧失是非常重要的。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种新的试剂盒。

本发明提供了一种检测高度近视的试剂盒，包括任选的用于检测ZNF644基因1901位，2156位，2180位，2238位，4138位，4718位中的一个或者多个基因位点变异的试剂。

所述的1901位变异为A→G变异，2156位变异为A→G变异，2180位变异为C→G变异，2238位变异为G→A变异，4138位变异为C→G变异，4718位为G→A变异。

上述试剂盒中的试剂为测序用试剂。该测序用试剂包括：

引物1：ACCAGGAGAGAAGACAGAAG；

和/或引物2：CCCTATGGTCACTTCTGATA；

和/或引物3：TTTTGAAATGCACAGGATAT；

和/或引物4：TGAATTGGGAGTTTTGATGT

和/或引物5：CCCCACAAGACTTGCATAGA。

上述试剂盒中的试剂为限制性内切酶酶切方法用试剂、限制性片段长度多态方法用试剂、SnaPshot用试剂、基因芯片用试剂。

上述试剂盒还包括任选的用于扩增包含ZNF644基因1901位，2156位，2180位，2238位，4138位，4718位中的一个或者多个基因位点的基因片段的试剂。该试剂为：

引物对A：

上游引物：ACCAGGAGAGAAGACAGAAG

下游引物：TTTTGAAATGCACAGGATAT；

和/或引物对B：

上游引物：TGAATTGGGAGTTTTGATGT

下游引物：CCCATTTTCCTGCTTTAGTA；

和/或引物对C：

上游引物：CCCCACAAGACTTGCATAGA

下游引物：CCTGTCCTGTAAGCATGTCA。

本发明上述试剂盒含有本发明特异性扩增目的片段的PCR引物对和特异性测定目的基因的碱基的引物，以及用于PCR扩增和进行测序的试剂盒的常规组件、试剂、缓冲液等，本领域技术人员熟知这些常规组件和检测方法。

用本发明上述试剂盒检测待检样品，确定ZNF644基因1901位，2156位，2180位，2238位，4138位，4718位六个SNP位点的多态性，样品没有限制，如体液(血液、腹水和尿液)、组织细胞(如肝组织)等，通过提取和纯化这些样品均可制备基因组DNA。