[发明专利]一种利用分子标记筛选具有优良生长潜力德国镜鲤选育系的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用分子标记筛选具有优良生长潜力德国镜鲤选育系的方法。

背景技术

德国镜鲤选育系是黑龙江水产研究所在引进的德国镜鲤原种的基础上，历时十年培育而成，其生长、抗寒、抗病力较原种均有较大提高，1996年被国家评定为良种。目前是黑龙江、吉林、辽宁、内蒙和新疆等多个省市的主要养殖鲤鱼品种。然而，近年来，由于养殖户的随意扩繁、近交等问题导致其优良性状，特别是生长性能衰退严重。因此，对生长性能进行选育改良势在必行。

传统选择需要等到鲤鱼发育至商品规格，生长性状得以显现后方能进行。在东北地区，受气候条件影响，鱼类生长期短，每年只有4个月左右，在越冬期，其体重不增反降，这给性状表现较晚的生长选育带来较大困难；此外，北方鲤鱼性成熟晚(一般需4年)，世代间隔长，这在很大程度上增加了利用子代表型性状评估亲本育种潜力的难度。上述原因导致传统表型选择办法存在选育周期长、准确性低的问题。

发明内容

本发明提供一种利用分子标记筛选具有优良生长潜力德国镜鲤选育系的方法，该方法可在早期进行选择，并提高选择的准确性。

本发明利用分子标记筛选具有优良生长潜力德国镜鲤选育系的方法，按以下步骤进行：一、从待测的1龄德国镜鲤选育系鳍条组织中提取基因组DNA；二、以提取的基因组DNA为模板，以IGF1F和IGF1R为引物进行PCR扩增，获得PCR产物；三、用1.5％的琼脂糖凝胶对PCR产物进行电泳检测，选择电泳结果为单条带的635bp的PCR产物所对应的德国镜鲤选育系，即完成筛选；其中步骤二中PCR扩增所用引物IGF1F的序列为5′-TCAGCACGCAAACGAAAGAC-3′，引物IGF1R的序列为5′-ACTCGATCCATTGGGGTCAG-3′。

本发明的优点：

本发明采用分子标记的方法，可直接对携有优良基因标记的个体进行早期选择。使用该方法筛选的个体，其1龄体长、2龄体重，净重及体重越冬损失等性状均显著优于其他个体，该方法的准确性高，操作过程简洁，用时短。

附图说明

图1是德国镜鲤选育系基因型为DD型的测序峰图；图2是德国镜鲤选育系基因型为II型的测序峰图；图3为具体实施方式四中PCR检测结果。

具体实施方式

本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。

具体实施方式一：本实施方式利用分子标记筛选具有优良生长潜力德国镜鲤选育系的方法，按以下步骤进行：一、从待测的1龄德国镜鲤选育系鳍条组织中提取基因组DNA；二、以提取的基因组DNA为模板，以IGF1F和IGF1R为引物进行PCR扩增，获得PCR产物；三、用1.5％的琼脂糖凝胶对PCR产物进行电泳检测，选择电泳结果为单条带的635bp的PCR产物所对应的德国镜鲤选育系，即完成筛选；其中步骤二中PCR扩增所用引物IGF1F的序列为5′-TCAGCACGCAAACGAAAGAC-3′，引物IGF1R的序列为5′-ACTCGATCCATTGGGGTCAG-3′。

本实施方式步骤一所述的提取基因组DNA的方法为常规方法。

本实施方式采用分子标记的方法，可直接对携有优良基因标记的个体进行早期选择。使用该方法筛选的个体，其1龄体长、2龄体重，净重及体重越冬损失等性状均显著优于其他个体，该方法的准确性高，操作过程简洁，用时短。

具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一不同的是：步骤二中PCR扩增的反应体系为20μL反应体系，由下列成分组成：

其它与具体实施方式一相同。

具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二不同的是：步骤二中PCR扩增的条件为：94℃变性5min，94℃变性30s，59℃退火15s，72℃延伸45s，共30个循环，再72℃延伸5min，4℃保温。其它与具体实施方式一或二相同。