[发明专利]一种疫苗佐剂CCL28及制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及基因工程、蛋白质工程和免疫学领域，具体地说，本发明涉及一种疫苗佐剂CCL28，同时还涉及一种疫苗佐剂CCL28的制备方法，还涉及一种疫苗佐剂CCL28的用途。

背景技术

在人类对抗疾病的过程中，疫苗发挥着至关重要的作用。自从第一个疫苗——天花疫苗的发明以来，许多曾经致死的疾病都因为相应疫苗的研制成功而得以攻克或使其死亡率大大降低。然后，至今仍然存在许多疾病急待有效疫苗的出现，如艾滋病、流感等，以及一些新生的病毒性疾病，如禽流感、SARS、拉沙热等(Rappuoli，R.，C.W.Mandl，et al.(2011).″Vaccines for the twenty-first century society.″Nat Rev Immunol.)。改良或研制出一个有效的疫苗可以从很多方面着手，其中选用合适佐剂是一种有效且易行的方法。合适的佐剂可以增强抗原的抗原性和免疫原性，从而使机体产生足够强的免疫力(包括体液免疫、细胞免疫和黏膜免疫等)，抵抗致病病原体的入侵和/或致病。

一个理想的佐剂应具有刺激机体针对抗原产生更强的免疫应答反应，而佐剂本身不具有或具有较弱的抗原性和免疫原性，不对机体产生其它副作用。细胞因子，由于其特殊的性质：一方面，它参与免疫系统的调节，与机体的免疫能力密切相关，另一方面，由于它是机体自身蛋白，从而本身不具有抗原性和免疫原性，近年来，成为疫苗佐剂研究的热点对象。IFN-α、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-15、IL-18和IL-21等都已证明具有较好的佐剂效应(Bolesta，E.，A.Kowalczyk，et al.(2006).″Increased level and longevity of protective immune responses induced by DNA vaccine expressing the HIV-1 Env glycoprotein when combined with IL-21 and IL-15 gene delivery.″J Immunol 177(1)：177-191.)(专利号：200510119721.5；200710306039.6；200610147664.6；200510119720.0；200480036307.1)。CC趋化因子配体28(CCL28)，又称为黏膜相关上皮细胞趋化因子(MEC)，主要表达于气管、直肠、结肠和阴道等黏膜表皮细胞，以及唾液腺等外分泌性腺体。CCL28通过与其受体CCR3和CCR10的相关互作用而趋化吸引IgA分泌浆细胞至黏膜表面或腺体(Lazarus，N.H.，E.J.Kunkel，et al.(2003).″A common mucosal chemokine(mucosae-associated epithelial chemokine/CCL28)selectively attracts IgA plasmablasts.″Journal of Immunology 170(7)：3799-3805；Hieshima，K.，Y Kawasaki，et al.(2004).″CC Chemokine Ligands 25 and 28Play Essential Roles in Intestinal Extravasationof IgA Antibody-Secreting Cells.″J Immunol 173(6)：3668-3675；Eksteen，B.，A.Miles，et al.(2006).″Epithelial inflammation is associated with CCL28 production and the recruitment of regulatory T cells expressing CCR10.″Journal of Immunology 177(1)：593-603；Sundtrom，P.，S.B.Lundin，et al.(2009).″Human IgA-secreting cells induced by intestinal，but systemic，immunization respond to CCL25(TECK)and CCL28(MEC)(vol 38，pg3327，2008).″European Journal of Immunology 39(11)：3267-3267.)。Kutzler等在研究流感疫苗时发现，以质粒形式的CCL28与质粒形式的抗原混合后，通过肌肉注射的方式免疫小鼠，不但能够提高血清中抗原特异性的IgG、IgA水平，外周IFN-γ水平，而且能够增强肠相关淋巴组织和肺部的抗体分泌(Kutzler，M.A.，K.A.Kraynyak，et al.(2009).″Plasmids encoding the mucosal chemokines CCL27 and CCL28 are effective adjuvants in eliciting antigen-specific immunity in vivo.″Gene Ther.)。另外，在HIV-1的研究中，Castelletti等发现HIV-1感染女性的母乳和唾液中HIV-1特异性抗体浓度与CCL28浓度正相关(Castelletti，E.，S.Lo Caputo，et al.(2007).″The Mucosae-Associated Epithelial Chemokine(MEC/CCL28)Modulates Immunity in HIV Infection.″PLoS ONE 2(10)：e969.)。