[发明专利]一种优化的适合自动化仪器的血小板聚集功能检测分析方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种适合于自动化仪器的通过自动测量血样在聚集前后血小板数量变化，并依据该变化数据自动进行分析计算获得对被检血样血小板聚集功能评价的一种血小板聚集功能检测的流程及分析方法，属于临床检验医学领域。 

二、背景技术

血小板聚集功能(或聚集率)是血液中血小板的一项重要功能，是评价血液凝血功能的一项重要指标。现有的血小板凝聚功能检测方法主要是通过检测血浆或全血中血小板聚集前后血浆(全血)中光密度(或光通性能)改变(简称：光学法)，或将电极放入待检全血中观察血样加入诱聚剂后血小板吸附在电极上导致的电极电阻变化(简称：电学法)。这些方法由于都各有一定缺陷，如光学法、电学法检测操作较繁琐、结果误差较大。之前亦有关于使用血液分析仪进行检测全血加入诱聚剂后血小板数量的变化，进行血小板聚集功能进行检测的方法。但由于现有的关于采用血液分析仪进行血小板聚集功能检测的方法较为简单，其还未达到较高的检测重复性水平。因此，本方法是对计数法检测分析血小板聚集功能的改良和优化。该流程方法适用于对采用计数方法的血小板聚集功能自动化分析仪器。 

三、发明内容

本发明的优化方法是依据本方法设计的一种专门的依据对血小板数量检测评价血样的血小板功能的仪器自动完成。全部检测只需要采用一份新鲜枸橼酸抗凝血样不断充分混匀，并不断连续对血样中血小板计数检测，包括对血样加入诱聚剂后的检测，根据血样中血小板数量在加入诱聚剂前后的变化判断该血样的血小板聚集功能水平。该方法的具体检测过程为：取一份新鲜枸橼酸抗凝 血样500ul连续混匀并连续检测二次计数血小板数量，记录血小板数量，并将该二次血小板计数结果平均作为未加诱聚剂前血小板基准值，随后仪器自动对血样中加入诱聚剂，仪器并自动对血样混匀、恒温孵育，在加入诱聚剂后120秒，仪器对血样开始计数，随后连续多次进行血小板检测计数，仪器自动将加诱聚剂后的血样检测获得的血小板计数值(不少于3次)进行平均，并将该平均值与加诱聚剂前检测获得的血小板基准值比较计算获得对该血样平均血小板聚集率值。由于现有对血小板计数仪器检测结果往往有一定偏差，采用单次计数结果难以获得稳定满意的检测结果。而采用本检测和计算方法得到的血小板聚集率结果，更加稳定，也就能更好地反映血样的血小板聚集功能。用该方法检测结果(平均血小板聚集率)的计算式如下： 

四、具体实施方式

本发明方法的检测分析流程为：将准备好的待检抗凝血样恒温并充分混匀，而后检测二次血样中血小板数量，如将二次血小板数量结果平均后以平均值与二个检测数据比较，若二个数据差异均不超过平均值的10％，则该平均值就作为本次检测的血小板数值的基准值。但若二个数据差值大于另一值的10％，则应再对血样进行一次检测，若再次检测的结果与之前检测的二个数据中任何一个接近，即与其中一个结果间的差值不超过10％，则这二个数据的平均值就作为本次检测的基准值。随后，对血样按9∶1(血∶诱聚剂)加入诱聚剂，充分混匀，并计时从加诱聚剂后120秒开始连续检测血样中血小板数量，将加诱聚剂后检测获得的血小板数据平均作为聚集后血小板数量的代表，而后按照本发明设计的计算方式即可计算出该样本的血小板聚集率值(也可称平均聚集率)。 

我们在实验室根据上述流程设计研制了一台以计数法为原理的血小板自动聚集分析仪按照本发明方法进行一批样本检测，获得了满意的检测结果。具体实验操作：随机抽取20份新鲜血样，每份各分为四份血样，并按照本方法流程自动检测并记录血小板数量和计算聚集率。同时，另采用20份新鲜血样采用相同量枸橼酸抗凝剂，用同一台自动血小板聚集分析仪进行检测记录血小板数量，且按照现有的血小板功能检测方法记录最大聚集率。将二组数据进行比较，可以看出二种方法获得的结果以本方法(平均聚集率法)所获得的结果重复性更好。 

表1.用本方法检测计算获得血小板聚集率重复性观察表 

*说明：表中“A”、“B”、“C”、“D”则代表同一样本分为4份样品后各自测试结果，其中为便于数据处理，将各次血小板计数平均值小数点后数据4舍5入。 

表2.用直接计数法检测计算血小板最大聚集率观察表 

*说明：表中“A”、“B”、“C”、“D”则代表同一样本分为4份样品各自测试结果对应值。为便于数据处理，将各次血小板计数平均值小数点后数据4舍5入。 

数据分析及结论：采用本发明方法对20个样本分别4次检测，累计误差为75.49；最大误差值的平均值为：3.77(％)。而采用最大聚集率检测计算法获得的血小板聚集率累计误差为：122.12，最大误差平均值为：6.11(％)。二者差异十分明显。说明采用本方法进行血小板聚集率检测结果比用最大聚集率法重复性更好。