[发明专利]一种简单实用的乳酸杆菌液体发酵方法

说明书

技术领域

本发明属于发酵工程技术领域，尤其涉及一种乳酸杆菌发酵方法和应用。

背景技术

乳酸杆菌为乳酸菌类一种，乳酸菌通常泛指能够利用碳水化合物进行发酵后产生大量乳酸的细菌。乳酸菌在自然界和人畜消化系统中广泛存在，其中绝大部分都存在于人体及动物的肠道，是机体必不可少且具有重要生理功能的菌群。常用的益生乳酸菌多为乳酸杆菌类。市面上也不缺乏动物用乳酸杆菌制品。

目前，对于乳酸杆菌的培养，多利用固态底物或者半固态底物培养基(例如乳制品、果汁制品等等)，发酵产品直接应用，但是此类方法生产的产品种类单一，成本偏高，应用范围狭窄，不适用于动物用保健品。也有人利用固态物料发酵生产动物饲料产品(专利申请号为：200910040347.8)，其配方确为饲料原料，但是其发酵工艺复杂，操作繁琐，对物料物理状态要求高，而且发酵48h后，菌含量仍然达不到很高。

对于乳酸杆菌的液体发酵培养，方法有限，常见的就是利用MRS液体培养基培养，获得液体发酵乳酸杆菌。

MRS培养基配方如下：

此配方中所用的蛋白胨、牛肉粉、酵母粉等成本高，不适于工业生产。

发明内容

鉴于上述问题，本发明旨在提供一种乳酸杆菌液体发酵方法，能够简化乳酸杆菌的液体发酵，并保证发酵后活菌数与传统发酵培养基一致，使其更好的应用于生产动物用乳酸杆菌制品。

本发明是这样实现的，

一种乳酸杆菌发酵方法，包括如下步骤：

配制包括如下组分的液体培养基；

将菌种种龄为2.5-5亿个/mL的乳酸杆菌按接种量为2.5-7.0％(v/v)接种于所述液体培养基，在pH为6-6.5、通气量为0.06-0.2vvm，温度为30-37℃条件下，发酵培养22-24小时。

该培养基组分如下：

本发明实施例进一步提供上述乳酸杆菌液体发酵方法所制备的乳酸杆菌在动物益生菌保健品中的应用。

本发明的优点及效果如下：

1、培养基配方原料成本低廉，适合工业化需要；

2、液体发酵效果可以与传统培养基相一致；

3、工艺简单，适合工业化生产；

4、应用范围广泛，适合生产各种动物用乳酸杆菌制品。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例证，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

本发明实施例提供一种乳酸杆菌发酵方法：包括如下步骤：

S01、配制包括如下组分的液体培养基；

S02、将菌种种龄为2.5-5亿个/mL的乳酸杆菌按接种量为2.5-7.0％(v/v)接种于所述液体培养基，在pH为6-6.5、通气量为0.06-0.2vvm，温度为30-37℃条件下，发酵培养22-24小时。

该培养基组分如下：

具体地，步骤S02中所用的乳酸杆菌，可以是植物乳杆菌，也可以是干酪乳杆菌、嗜酸性乳杆菌中的任意一种。此3种乳酸杆菌，均购自广东省微生物菌种保藏中心。其编号分别为：植物乳杆菌：GIM1.140＝AS1.3；嗜酸乳杆菌：GIM1.208＝AS1.2686；干酪乳杆菌：GIM1.325＝ATCC7469。

具体地，步骤S02中，使用碱性剂调节发酵过程中的PH值，该碱性剂没有限制，例如，氢氧化钠、氨水等。

具体地，步骤S02中，菌种种龄为2.5-5亿个/mL，其培养过程为：从MRS固体斜面培养基中挑取菌落，接入30mL MRS液体培养基中，37℃恒温摇床中培养，转速为200rpm，培养16-18小时。

实施例证

1、从MRS固体斜面培养基中挑取菌落，接入30mL MRS液体培养基中，37℃恒温摇床中培养，转速为200rpm，培养16-18小时。植物乳杆菌的菌种种龄为4-5亿个/mL。

MRS培养基组分如下：

固体培养基需加入琼脂粉15.0g。将上述成分加人蒸馏水中，加热溶解，校正pH 6.2，分装后121℃高压灭菌15min-20min。