[发明专利]一种重金属污染土壤生物淋滤修复方法

权利要求书

1.一种重金属污染土壤生物淋滤修复方法，其特征在于，将菌株Penicillium Chrysogenum F1，CGMCC No.5599的菌液用于淋滤修复重金属污染的土壤。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的菌液是经过改良察氏液体培养基培养得到的菌液，改良察氏液体培养基组成为：90g葡萄糖，1g K₂HPO₄，3g NaNO₃，0.5g MgSO₄，0.5g KCl，0.01g FeSO₄，加水至1L，用0.1mol/L HCl调节培养基pH＝7.0。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，具体包括以下步骤：

(1)取已配好的改良察氏液体培养基灭菌；待灭菌培养基冷却后，接种菌株Penicillium Chrysogenum F1，CGMCC No.5599的孢子液，培养，制备用于重金属污染土壤生物淋滤的菌液；

(2)将重金属污染土壤风干破碎；

(3)土壤用步骤(1)得到的菌液淋滤。

4.根据权利要求3所述的应用方法，其特征在于，

步骤(1)中的孢子液是挑取Penicillium chrysogenum F1菌落，于察氏固体培养基培养以获取菌株孢子用于接种，7天后，用无菌枪头吸取无菌水冲洗Penicillium chrysogenum F1的菌落表面，制备Penicillium chrysogenum F1 107～108数量级的孢子液。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，

步骤(1)中取49mL已配好的改良察氏液体培养基，装入250mL锥形瓶中，置于150℃灭菌锅中灭菌30min。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，

步骤(1)中待灭菌培养基冷却后，接种1-2mL孢子液，置于25℃恒温振荡培养箱中培养7-8天，制备用于重金属污染土壤生物淋滤的菌液。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)中重金属污染土壤包括Pb、Zn、Cu和Cd污染的土壤，其含量分别不低于500mg/kg、500mg/kg、400mg/kg和1mg/kg。

8.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤(2)中土壤破碎后过2mm筛，取筛下土壤置于150℃灭菌锅中灭菌30min。

9.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤(3)中待修复土壤质量与菌液体积的比例为1∶20～7∶40。

10.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤(3)中淋滤温度为25～30℃；淋滤速度120～150r/min；恒温，120～150r/min振荡，淋滤8～10天。