[发明专利]凹凸棒石表面印迹人参皂苷G-CK的分子印迹材料的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用天然矿物材料化学复合修饰制备的分子印迹材料，属于天然矿物资源利用技术领域，具体涉及一种凹凸棒石表面印迹人参皂苷G-CK的分子印迹材料的制备方法。

背景技术

人参皂苷G-CK（Ginsenoside Compound K，缩写G-CK）是五加科植物人参属人参、西洋参、三七等以及葫芦科植物绞股蓝等药材及相应制剂口服后的主要活性代谢产物，一种非天然人参皂苷成分，是天然原人参二醇型皂苷群经体内肠道益生菌代谢转化产物，是一种国际公认最具潜力的治疗肿瘤和艾滋病的高附加值化合物，具有抑制多种肿瘤细胞增殖、生长、浸润、转移等功效，诱导肿瘤细胞凋亡，还具有提高机体免疫力、改善微循环、抗炎、抗过敏、保肝、抗衰老、减毒、增强学习和记忆能力、促进皮肤内胶原蛋白的表达等多种功能。虽具有广泛的商业应用及临床应用价值，但其难于分离纯化。

分子印迹技术（molecular imprinting technique, MIT），亦称为分子烙印技术、分子模板技术，是源于生物化学、高分子化学、材料科学等学科的一门交叉学科技术，属于超分子化学研究范畴，是指以某一特定的目标分子（模板分子、印记分子或烙印分子）为模板，制备对该分子具有特异选择性聚合物的过程，通常被描述为制备与识别“分子钥匙”的人工“锁”技术（谭天伟. 分子印迹技术及应用. 北京: 化学工业出版社, 2010.6）。因分子印迹技术具有构效可预知性、特异识别性和广泛适用性等三大优势，受到各国学术结构、企事业团体广泛重视，并投入巨资进行应用研究。分子印迹聚合物具有亲和性及选择性高、抗恶劣环境能力强、稳定性好、使用寿命长、应用范围光等特点。分子印迹技术在许多领域，如在色谱分离、固相萃取、仿生传感、模拟酶催化、临床药物分析、膜分离等领域得到日益广泛的研究和开发，在生物工程、天然药物分离、临床医学、食品工业、环境监测等行业形成广泛的应用。除针对人参皂苷Rg1已开发有相应的分子印迹材料（刘庆山, 尹小英, 黄火强, 等. 人参皂苷Rg1分子印迹材料，其制备方法，其应用. 中国专利, CN 102166512 A, 2010年8月31日公开），针对其它人参皂苷化合物的分子印迹材料研发未见相关报道，尤其是人参皂苷的代谢产物。

凹凸棒石是一种具有优良吸附性能的天然硅镁酸盐，具有独特的纳米棒晶结构，也是一种天然的纳米材料，对含有羟基、醛基、羰基等含氧有机物具有独特的吸附能力。凹凸棒石是一种层链状硅酸盐黏土，其独特的显微结构包括三个层次：一是凹凸棒石的基本结构单元—棒晶，属一维纳米材料，是长约1μm，直径0.01μm的针状晶体；二是由棒晶紧密平行聚集而成的棒晶束；三是由晶束(也包括棒晶)间相互聚集而形成的各种层链状聚集体。其独特的一维纳米棒晶结构和良好的表面活性决定了它是制备纳米有机-无机复合物的理想无机材料，可以在微米填充和纳米增强两个水平上与聚合物进行功能复合，是优良的补（增）强材料。

中药成分人参皂苷的传统分离纯化载体有硅胶、大孔吸附树脂、三氧化二铝、硅藻土、反相硅胶等，是利用成分在固定相与流动相之间的分配系数的差异实现分离纯化的，最大缺点是选择性差，富集容量低，尤其是对一些结构复杂、多手性位、含量低的高活性化合物，分离纯化难度大，运用常规的载体材料进行分离纯化往往需要反复操作，结果使得最终收率极低，甚至造成手性构型改变而失活。

基于分子印迹材料具有构效可预知性、特异识别性和广泛适用性等三大优势，依据特定模板分子量身订做相应的分子印迹材料，将模板分子洗脱后，留下与模板分子的形状、大小以及识别位点相匹配的空隙，该空隙能够重新识别模板分子，以此分子印迹材料作为相应模板分子的分离纯化载体材料，可实现模板分子的高效、快速分离纯化，且分离成本较低。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种凹凸棒石表面印迹人参皂苷G-CK的分子印迹材料的制备方法，以人参皂苷G-CK为模板分子、纳米凹凸棒石为载体基质，采用凹凸棒石进行表面化学修饰引入适当的官能基团、筛选系列功能单体、表面聚合制备G-CK分子的表面分子印迹材料，并以此材料作为纯化载体进行动态固相萃取及静态吸附从粗提取物和代谢样品中定向分离、富集G-CK分子，由此提高目标化合物的收率，克服天然药物成分及其代谢产物常规分离纯化载体的缺点及存在的问题。

本发明的技术解决方案是：以原人参二醇型皂苷群的主要代谢产物G-CK为模板分子，经化学改性的纳米凹凸棒石为基质，合成表面分子印迹材料；具体步骤如下：