[发明专利]一种高纯度闭联茄定二烯二醇的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种高纯度闭联茄定二烯二醇的制备方法。

背景技术

闭联茄定二烯二醇（Etioline，Veralosidine，Deoxyveralodisinol），CAS登录号为29271-49-6，分子式为C₂₇H₄₃NO₂，分子量为413.65，是一种甾体生物碱类化合物，为无色针晶（丙酮），mp.149-151℃。广泛存在于百合科、茄科等植物中，如百合科植物狭叶藜芦Veratrum stenophyllum Diels全草、茄科植物珊瑚豆Solanum capsicastrum Link根皮等。现代药理研究表明，闭联茄定二烯二醇具有保肝和细胞毒活性。目前关于闭联茄定二烯二醇的研究较少，尚未发现大量制备高含量闭联茄定二烯二醇的方法报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种猪毛菜碱的制备方法，该方法产品收率高、含量高。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：

（1）将狭叶藜芦全草粉碎后用65-95%乙醇热回流提取2-4次，每次1-2.5h，合并提取液，过滤、浓缩得浓缩液；

（2）将浓缩液加水稀释后加入到大孔吸附树脂柱上，以20倍去离子水洗脱杂质，再以10倍体积0.05-0.1%的氨水或氢氧化钠水溶液洗脱，然后用10-40%乙醇溶液洗脱，最后用75-95%乙醇洗脱得到狭叶藜芦总甾体生物碱洗脱液，减压浓缩得浸膏；

（3）以氯仿-甲醇-正丁醇-0.1%氨水为溶剂系统，采用高速逆流色谱仪分离闭联茄定二烯二醇，收集闭联茄定二烯二醇组分，浓缩、干燥即得高纯度闭联茄定二烯二醇。

所述步骤（2）中大孔吸附树脂可选D101、AB-8、HPD100、Diaion HP40型大孔树脂中的一种。

所述步骤（3）中氯仿-甲醇-正丁醇-0.1%氨水体积比为（25-30）:（35-45）:（4-8）:（15-23）。

所述步骤（3）中溶剂系统以上相为固定相，下相为流动相。

本发明的有益效果在于：本发明用乙醇水溶液加热回流提取，经大孔吸附树脂柱富集、高速逆流色谱法纯化，具有自动化程度高、操作简单、纯度高等优点，易于规模化生产。

具体实施方式

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

实施例1：

将狭叶藜芦全草粉碎，用70%乙醇加热回流提取3次，每次1.5h，合并提取液，过滤、浓缩得到浓缩液，将浓缩液加水稀释后加入D101大孔吸附树脂柱，先以20倍去离子水洗脱杂质，再以10倍体积量的0.05%氨水水溶液洗脱，然后用20%乙醇洗脱，最后用80%乙醇洗脱，收集80%乙醇洗脱液，减压浓缩得到浸膏；取氯仿、甲醇、正丁醇、0.1%氨水按体积比为28:43:7:20混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为850rpm，取下相溶解浸膏注入色谱仪，控制流动相流速为4ml/min，收集闭联茄定二烯二醇流分，浓缩、干燥得闭联茄定二烯二醇，经HPLC检测，其含量为95.6%。

实施例2：

将狭叶藜芦全草粉碎，用65%乙醇加热回流提取4次，每次1h，合并提取液，过滤、浓缩得到浓缩液，将浓缩液加水稀释后加入AB-8大孔吸附树脂柱，先以20倍去离子水洗脱杂质，再以10倍体积量的0.1%氨水水溶液洗脱，然后用10%乙醇洗脱，最后用85%乙醇洗脱，收集90%乙醇洗脱液，减压浓缩得到浸膏；取氯仿、甲醇、正丁醇、0.1%氨水按体积比为25:37:6:23混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速为850rpm，取下相溶解浸膏注入色谱仪，控制流动相流速为2.5ml/min，收集闭联茄定二烯二醇流分，浓缩、干燥得闭联茄定二烯二醇，经HPLC检测，其含量为96.1%。

实施例3：