[发明专利]通关藤药材及制剂指纹图谱的建立方法及应用

权利要求书

1.通关藤药材甾体皂苷类指纹图谱的建立方法，其特征在于：包括以下步骤：

(a)供试品的制备：取通关藤药材适量，粉碎，过筛，精密称取药材粉末1g，精密加入甲醇40ml，再称重；40KHz超声提取10分钟以上，自然冷却，用甲醇补足重量，振摇混合均匀；过滤，取续滤液20ml挥干，残渣用甲醇1ml溶解，经0.45μm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液，

(b)参照物溶液的制备：精密称取Tenacissosides A 12mg，置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，参照物溶液即得，

(c)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相A为水，流动相B为乙腈，梯度洗脱：0～23min：75％A→65％A，25％B→35％B；23～48min：65％A→50％A，35％B→50％B；48～60min：50％A→50％A，50％B→50％B；60～90min：50％A→20％A，50％B→80％B；90～100min：20％A→10％A，80％B→90％B；100～101min：10％A→75％A，90％B→25％B；101～120min：75％A→75％A，25％B→25％B；柱温：35℃，流速：0.8ml/min，检测器：蒸发光散射检测器；雾化气体流速：1.5-3.5L/min；漂移管温度：80-115℃，

(d)测定：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，记录0～120分钟的色谱峰，得到通关藤药材甾体皂苷类指纹图谱。

2.根据权利要求1得到的通关藤药材甾体皂苷类指纹图谱，其特征在于：包括11个共有峰，其中4(S)为Tenacissosides A对照峰，各特征峰的相对保留时间为： 0.56±10%(1)、0.59±10%(2)、0.92±10%(3)、1.00±10%(4)、1.06±10%(5)、1.09±10%(6)、1.27±10%(7,S)、1.38±10%(8)、1.41±10%(9)、1.49±10%(10)、1.96±10%(11)。

3.一种通关藤药材质量控制的方法，其特征在于：包括以下步骤：

(a) 待测通关藤药材甾体皂苷类指纹图谱的测定：取待测通关藤药材，按权利要求1所述的方法处理并测定待测通关藤药材甾体皂苷类指纹图谱，

(b) 通关藤药材质量控制：将待测通关藤药材的甾体皂苷类指纹图谱与标准指纹图谱对比，以特征峰计算，相似度不低于0.85的药材质量合格。

4.通关藤注射液酚酸类指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括以下步骤：

(a)供试品的制备：取通关藤注射液，经0.45μm滤膜过滤，续滤液即为供试品溶液，

(b)参照物溶液的制备：精密称取绿原酸对照品适量，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得，

(c)色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相A为0.05％磷酸水溶液，流动相B为0.05％磷酸乙腈溶液，梯度洗脱：0～20min：98％A→96％A，2％B→4％B；20～70min：96％A→93％A，4％B→7％B；70～110min：93％A→90％A，7％B→10％B；110～115min：90％A→85％A，10％B→15％B；115～116min：85％A→98％A，15％B→2％B；平衡时间10分钟；流速1.0ml/min；检测器：紫外检测器；检测波长300nm；柱温25℃，理论板数按绿原酸峰计算应不低于6000，

(d)测定：分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，记录0分钟～116分钟的色谱峰，得到通关藤注射液酚酸类指纹图谱。

5.根据权利要求4得到的通关藤注射液酚酸类指纹图谱，其特征在于：包括11个共有峰，其中5(S)为绿原酸对照峰，各特征峰的相对保留时间为：0.26±10%(1)、0.50±10%(2)、0.55±10%(3)、0.94±10%(4)、1.00±10%(5，S)、1.10±10%(6)、1.15±10%(7)、1.25±10%(8)、1.39±10%(9)、1.45±10%(10)、1.53±10%(11)。