[发明专利]使用薄层层析或纸层析的方法检测糖化血红蛋白

说明书

技术领域

本发明是一种新的检测糖化血红蛋白的方法，在不需要电源的情况下使用薄层层析或纸层析分离糖化和非糖化血红蛋白，然后使用目测比色和手工测量的方法检测糖化血红蛋白。

背景技术

目前检测糖化血红蛋白的方法主要是使用仪器检测，早期检测以电泳法、微柱层析法、免疫比浊法应用较广泛，目前高效液相色谱法、酶法和化学发光法(IVIA法)检测已开始在临床应用。

本发明的基本原理和方法是使用薄层层析或纸层析进行目测检测，此方法的优点一是廉价，便于普及。二是简单，使用全血，不用分离血红蛋白。三是不用仪器和电源，其检测性能与其它方法相当。

发明内容

本发明是根据糖化血红蛋白与非糖化血红蛋白所带电荷的不同，利用薄层层析或纸层析的方法将其分离，同时根据其在薄层层析或纸层析介质表面形成的的颜色(或图谱或色斑，下同)深浅和面积大小与其含量成正比的原理对其进行定量检测。检测的方法有两种：一是比色法，将被检测的全血样品层析分离前在层析介质表面形成的颜色和层析分离后的糖化血红蛋白在层析介质表面形成的颜色与标准血红蛋白的标准颜色进行目测比色和计算来检测糖化血红蛋白在总血红蛋白中的比例。二是通过测量计算样品的糖化和非糖化血红蛋白在薄层层析或纸层析介质表面形成的面积来检测糖化血红蛋白在总血红蛋白中的比例。

具体实施方式

1.首先将已知的不同血红蛋白浓度的标准血液取相同体积加入层析介质的表面，待其完全浸入后精确测量记录其形成的血斑颜色、并将其作为标准颜色。

2.将待检测的样品在未层析前在层析介质的表面形成的色斑颜色与标准颜色比色检测样品的总血红蛋白浓度。

3.之后加入流动相进行层析，流动相中含有溶血剂，血液与流动相接触后即发生溶血释放出血红蛋白，糖化血红蛋白随流动相向前迁移。

4.层析结束后在层析图谱最前面的色斑即是糖化血红蛋白，将其颜色与标准颜色比色检测糖化血红蛋白浓度，糖化血红蛋白的浓度除以总血红蛋白的浓度即是糖化血红蛋白在总血红蛋白中的比例。

5.层析结束后在层析图谱最前面的色斑即是糖化血红蛋白，后面是非糖化血红蛋白，分别计算糖化血红蛋白和非糖化血红蛋白形成的色斑面积，糖化血红蛋白面积除以非糖化血红蛋白面积与糖化血红蛋白面积之和即是糖化血红蛋白在总血红蛋白中的比例。