[发明专利]象草的快速繁殖方法

说明书

一、技术领域

本发明涉及一种象草的快速繁殖方法，属于植物细胞工程技术领域。

二、背景技术

象草(Pennisetum Purpureum Schumach)又名紫狼尾草，为禾本科狼尾草属多年生 草本植物，原产热带非洲，适宜在热带和亚热带地区栽培。象草不仅可作为草食畜禽 和水产鱼类的优质青饲料，优质纸浆和中高档复合人造板的理想原料，还是重要的生 物质能源作物，国内外种植面积正在迅速扩大。

尽管象草为多年生草本植物，但在我国长江中下游及其相同纬度地区不能自然开 花结实，即使结实，也由于种子成熟期不一、易于落粒和发芽率极低的原因，国内外 象草繁殖通常采用生长2个月左右的茎节为材料无性扩繁，具有繁殖系数低、操作费 力费工的不足。江洪如等以矮象草幼嫩茎节为外植体，建立了矮象草的试管快繁技术 体系(如江洪如，佘发新，王碧琴，刘腾云.矮象草的试管快繁技术研究，2003：472， 中国重要会议全文数据库)，有效利用了幼嫩茎节，具有较高的繁殖系数；钟小仙等 以象草幼穗为外植体，建立了“象草体细胞培养植株再生方法”(ZL 200610085256.2)， 为利用象草幼穗进行种苗扩繁提供了可能，但存在现有幼穗离体培养不能诱导丛生 苗，繁殖系数低的不足。本方法以象草幼穗为材料，通过改进培养基配方和培养条件， 经幼穗愈伤组织诱导、丛生苗诱导以及增殖和壮根培养，具有繁殖率高、操作简便的 特点，为象草的快速繁殖提供了又一有效方法。

三、发明内容

本发明的目的在于提供一种以象草幼穗为外植体进行快速繁殖的方法，弥补现有 象草繁殖技术以利用茎节为主的不足；通过改进培养基配方和培养条件，改进现有象 草幼穗离体培养植株再生方法，通过诱导丛生苗，提高繁殖系数。

本发明的技术方案如下：

利用象草幼穗为外植体，通过不同激素配比和改善光照条件，进行愈伤组织诱导 和分化，促使愈伤组织直接分化为丛生苗，经丛生苗增殖和壮根培养，1个象草幼穗 可产生85～406株细胞工程苗。

具体步骤如下：

①外植体的选择与灭菌

选用象草的幼穗为外植体，在无菌条件下用70％的酒精彻底擦拭包在幼穗外部 的叶鞘和茎，剥出幼穗，切成2～3mm长的片段；

②幼穗愈伤组织诱导

把幼穗的切段接种于下列培养基中：改良的MS(MS中铁盐含量加倍)+4.0mg/L 2，4-二氯苯氧乙酸(2，4-D)+0.05mg/L激动素(KT)+30g/L蔗糖+8g/L琼脂条+0.5 g/L活性碳，pH值为5.8；培养室温度为26℃～28℃，光强1500～2000Lx，光照时间 为16小时/天，培养时间为35～40d；

③丛生苗诱导

将幼穗诱导的颗粒状愈伤组织培养于下列培养基中：改良的MS+3～4mg/L 6-BA(或 3～4mg/L KT)+30g/L蔗糖+8g/L琼脂条+0.5g/L活性碳，pH值为5.8；培养室温度 为26℃～28℃，光强2500～3000Lx，光照时间为16小时/天，培养时间为30～35d；

④丛生苗增殖和壮根培养

将丛生苗中具有3张完整叶的分蘖在无菌条件切割分离后，分别接种于下列培养 基中：MS+4mg/L 6-BA(或4mg/L KT)+30g/L蔗糖+8g/L琼脂条+0.5g/L活性碳，pH 值为5.8；培养室温度为26℃～28℃，光强3500～45000Lx，光照时间为16小时/天， 培养时间为25～30d。

(2)细胞工程苗的苗床移栽

将上述根系发达、生长良好的细胞工程苗，移栽至温室或大田苗床，环境温度控 制在25～35℃；苗床的土壤具有较好的肥力，排灌方便，去除杂草，精细整地，做畦， 畦长自定，畦宽1～1.5米为宜，行株距为20～25cm×10～15cm，移栽时浇透水，7d内 保持土壤湿润，14～20d时，可施用尿素2～3kg/666.7m²，施肥后雍根，并把尿素埋入 土中，生长30d以后，可作为种苗向大田移栽。

有益效果

本发明与现有技术相比具有如下优点和积极效果：