[实用新型]蛋白质浓缩/纯化装置

说明书

技术领域：

本实用新型涉及化学仪器，具体地说是一种利用等电凝胶桥隔离法浓缩/纯化蛋白质的装置。

背景技术：

目前蛋白质的浓缩/纯化方法较多，主要有盐析法、等电点沉淀法、低温有机溶剂沉淀法、透析和超滤、凝胶过滤法、离子交换层析法等，每种方法都有自己的设备，这些设备有的操作过程较复杂，有的分离纯化时间较长，有的纯化成本较高。

实用新型内容：

本实用新型的目的是为克服现有技术的不足，而提供一种蛋白质浓缩/纯化装置，该装置结构简单，易操作，分离过程快、纯化成本低。

本实用新型主要由直流电源、待浓缩/纯化蛋白质原池、正极池、负极池及凝胶玻璃桥管组成。正极池、负极池与直流电源的正、负极接通。正极池、负极池分别由凝胶玻璃桥管与待浓缩/纯化蛋白质溶液原池连通；原池在正极池、负极池之上之下均可。

所述凝胶玻璃桥管，用1％琼脂将其下端封住，冷凝30分钟，灌1～12％的隔离胶，灌到4～15cm，用水封住，冷凝30分钟将水倒出，吸干，冷凝30分钟后备用。使用时，玻璃桥管要浸在正、负极池及原池中。

所述的正极池、负极池倒入缓冲液5ml，原池加入缓冲液100～150ml，再把待分离纯化的蛋白质溶液加入原池。

所述的池中缓冲液为PH值2～9：由36.6gTris，48ml 1mol/l的HCl或先加水至80ml，用浓HCl调PH，再定容至100ml制成。

所述的隔离胶由4.9ml蒸馏水，1～6.0ml30％的丙烯酰胺，3.8ml1.5mol/lTris-HCl，150μl 10％的过硫酸铵，6μl TEMED配制而成。

所述的直流电压为50～300V。

蛋白质纯化仪安装好后，在4℃环境中，加上电泳电压，此时待分离的蛋白质及氨基酸分别按其电荷的性质从原池通过凝胶桥管进入正极池及负极池，而等电点等于原池PH的蛋白质则留在原池。通过调节原池的PH值，使不同等电点的蛋白质在电场作用下进入正、负极池，直至纯化为止。

分离纯化的标准：蛋白质纯度以SDS-丙烯酰胺凝胶电泳图谱出现单一区带为标准；氨基酸纯度以氨基酸分析仪出现单峰为标准。

本实用新型的优点在于：浓缩纯化方法新颖，操作容易，分离设备简单，成本低，分离纯化时间缩短、效率高。

附图说明：

图1为本实用新型结构示意图。

1为直流电池、2为正极池、3为负极池、4为凝胶玻璃桥管、5为待分离纯化物质原池。

具体实施方式：

本实用新型由直流电源1、待浓缩/纯化物质原池5、正极池2、负极池3及凝胶玻璃桥管4组成，正极池2、负极池3与直流电源1的正、负极接通，正极池2、负极池3分别由凝胶玻璃桥管4与待浓缩/纯化溶液原池5连通。

其中直流电源电压为100V，原池5为1000厘米³，正极池2、负极池3均为1厘米³；凝胶玻璃桥管，用1％琼脂将其下端封住，冷凝30分钟，灌1～12％的隔离胶，灌到4～15cm，用水封住，冷凝30分钟将水倒出，吸干，冷凝30分钟后备用。使用时，玻璃桥管要浸在正、负极池及原池中；正极池、负极池倒入缓冲液5ml，原池加入缓冲液100～150ml，再把待分离纯化的蛋白质溶液加入原池；池中缓冲液(PH值2～9)：由36.6gTris，48ml 1mol/l的HCl或先加水至80ml，用浓HCl调PH，再定容至100ml制成；隔离胶由4.9ml蒸馏水，1～6.0ml30％的丙烯酰胺，3.8ml1.5mol/l Tris-HCl，150μl 10％的过硫酸铵，6μl TEMED配制而成。