本发明提供一种胃蛋白酶原Ⅰ和Ⅱ联合检测试剂盒,包括已包被抗PGⅠ和PGⅡ抗体的酶联板,抗PGⅠ抗体是将PGⅠ抗原部分基因序列PGⅠ‑A和PGⅠ‑B分别通过基因工程克隆表达得到PGⅠ‑A和PGⅠ‑B重组蛋白,并将其免疫小鼠制备得到单克隆抗体;PGⅠ‑A的核苷酸序列参见序列表中SEQ ID No.1,PGⅠ‑B的核苷酸序列参见序列表中SEQ ID No.2;抗PGⅡ抗体是将PGⅡ抗原基因序列通过基因工程克隆表达得到PGⅡ重组蛋白,并将其免疫小鼠制备得到单克隆抗体,PGⅡ抗原的核苷酸序列参见序列表中SEQ ID No.3。本发明的试剂盒可同时检测PGⅠ和PGⅡ,操作简单,检测快速。