本发明涉及分子生物学中的基因技术领域,具体涉及葡萄生根调控基因PCNT及其编码蛋白与应用。所述生根调控基因PCNT全长为由SEQ ID NO.1所示核苷酸序列组成,PCNT基因编码区(ORF)核苷酸序列如SEQ IN NO.2所示,其蛋白序列由SEQ ID NO.3所示。本发明从“巨峰”葡萄中,经过激光量子诱变结合三次赤霉素浸泡后,剪取葡萄的根,提取总RNA后纯化获得mRNA,构建cDNA文库,然后挑选阳性克隆测序,获得了PCNT基因序列信息。经过两端RACE技术,扩增获得了PCNT基因全长序列。然后将其在葡萄中过表达,获得生根数量较多的转基因葡萄植株。该基因在葡萄的生根调控中发挥了关键作用。
本发明涉及PCNT基因第五号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第五号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第五号外显子的第256位的A->G多态性。该SNP导致编码蛋白第62位发生Lys(K)->Glu(E)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第三十九号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第三十九号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第三十九号外显子的第441位的A->G多态性。该SNP导致编码蛋白第104位发生Gln(Q)->Arg(R)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第三十九号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第三十九号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第三十九号外显子的第346位的T->C多态性。该SNP导致编码蛋白第116位发生Cys(C)->Arg(R)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第十号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第十号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第十号外显子的第328位的T->C多态性。该SNP导致编码蛋白第53位发生Ile(I)->Thr(T)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第十三号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第十三号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第十三号外显子的第268位的A->G多态性。该SNP导致编码蛋白第58位发生Glu(E)->Gly(G)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第十四号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第十四号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第十四号外显子的第215位的T->G多态性。该SNP导致编码蛋白第37位发生Met(M)->Arg(R)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第十五号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第十五号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第十五号外显子的第128位的A->G多态性。该SNP导致编码蛋白第9位发生Thr(T)->Ala(A)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第十六号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第十六号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第十六号外显子的第273位的T->C多态性。该SNP导致编码蛋白第91位发生Val(V)->Ala(A)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第十九号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第十九号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第十九号外显子的第219位的T->C多态性。该SNP导致编码蛋白第8位发生Cys(C)->Arg(R)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第三十三号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第三十三号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第三十三号外显子的第184位的A->G多态性。该SNP导致编码蛋白第19位发生Gln(Q)->Arg(R)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第四十六号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第四十六号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第四十六号外显子的第219位的A->C多态性。该SNP导致编码蛋白第11位发生Arg(R)->Ser(S)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第三十八号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第三十八号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第三十八号外显子的第209位的C->G多态性。该SNP导致编码蛋白第21位发生Gln(Q)->Arg(R)改变,从而改变了蛋白活性。
本发明涉及PCNT基因第三十六号外显子的单核苷酸多态性(SNP)。本发明提供了分析PCNT基因第三十六号外显子的SNP或其活性的方法。本发明的SNP是SEQ ID NO:1所示序列的人PCNT基因第三十六号外显子的第264位的A->G多态性。该SNP导致编码蛋白第51位发生Thr(T)->Ala(A)改变,从而改变了蛋白活性。