本申请公开了一种用于高致病性H7禽流感病毒检测的试剂、方法和应用。本申请用于高致病性H7禽流感病毒检测的试剂，包括引物对和/或探针，引物对和/或探针针对高致病性H7禽流感病毒的特异识别序列而设计，特异识别序列为Seq ID No.1所示序列，或Seq ID No.1所示序列反向互补序列本申请的试剂，能有效区分高致病性H7禽流感病毒和低致病性H7禽流感病毒，为及时采取有效的防控措施提供了技术支撑与指导，减少了因无法区分H7禽流感致病性高低而造成的畜禽养殖业的经济损失。
本发明公开了一种具有低受体结合活性的高致病性H7N9禽流感病毒抗原及其制备方法，包括以下步骤：制备突变HA基因：制备突变后的高致病性H7N9禽流感病毒全长HA蛋白的基因序列，得到R229I突变HA基因；其中所述R229I突变HA基因序列如SEQ ID NO.2所示；拯救病毒：采用R229I突变HA基因拯救重组流感病毒。该方法制备出的重组高致病性H7N9禽流感病毒，将位于受体结合区域的229位点的精氨酸突变为异亮氨酸，降低HA蛋白受体结合亲和力。
本发明公开了一种具有低受体结合活性的高致病性H7N9禽流感病毒抗原及其制备方法，包括以下步骤：制备突变HA基因：制备突变后的高致病性H7N9禽流感病毒全长HA蛋白的基因序列，得到R220G突变HA基因；其中所述R220G突变HA基因序列如SEQ ID NO.2所示；拯救病毒：采用R220G突变HA基因拯救重组流感病毒。该方法制备出的重组高致病性H7N9禽流感病毒，将位于受体结合区域的220位点的精氨酸突变为甘氨酸，降低HA蛋白受体结合亲和力。
