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[发明专利]一种长春新碱的生产方法-CN201410307355.5无效
发明人：倪建平 -专利权人：倪建平
申请日： 2014-06-30 - 公布日： 2014-09-10 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：本发明提供了一种长春新碱的生产方法，包括如下步骤：S1、长春花晒干、磨粉，加入30～50ml水搅拌，加入苯，S2、加入酒石酸液萃取，过滤并加入氨水碱化，加入三氯甲烷提取生物碱，S3、生物碱加入乙醇放置8-14个小时，析出结晶过滤，得到长春碱，S4、乙醇液减压回收乙醇，得到纯化生物碱，S5、加入无水乙醇和3％～5％硫酸，放置24～28个小时，得到长春碱和长春新碱混合物，S6、用苯和三氯甲烷的混合液洗脱，分段收集得到长春新碱。本发明收集率提高了长春新碱的收集纯度，纯度达98％，并且优化了工艺参数。
一种长春新碱生产方法

[发明专利]酒石酸长春瑞滨的合成方法-CN200710097400.9无效
发明人：刘全胜 -专利权人：刘全胜
申请日： 2007-05-15 - 公布日： 2007-09-19 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种酒石酸长春瑞滨的合成方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)以酒石酸长春质碱和文多灵为起始原料，经三氯化铁和盐酸的作用进行反应；(2)将反应产物与硼氢化钠进行反应得到脱水长春碱；(3)脱水长春碱经三氟乙酸酐处理开环、重排最后得到长春瑞滨；(4)将长春瑞滨与酒石酸成盐得到酒石酸长春瑞滨。
酒石酸长春合成方法

[发明专利]一种长春碱类生物碱的分离纯化方法-CN200910042236.0有效
发明人：黄翔;冯锦玲;陈日星;张燕娜;罗展良;梁丽思 -专利权人：广州汉方现代中药研究开发有限公司
申请日： 2009-08-28 - 公布日： 2010-02-03 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：一种长春碱类生物碱的分离纯化方法，包括如下步骤：(1)粗品的预处理：将长春碱类生物碱粗品湿法上于氧化铝柱上，洗脱，收集生物碱流份，合并后减压浓缩至干，得预处理制品；(2)高效液相色谱分离：先制备色谱柱固定相，填料为硅胶，进样，梯度洗脱，检测器跟踪制备色谱分离情况，薄层层析或高效液相检测，合并富含长春碱流份；(3)重结晶：将生物碱流份减压浓缩至干，低级脂肪醇溶解，然后放置结晶，过滤，干燥。本发明适用于长春碱类生物碱的分离纯化，无须使用特殊填料，也不需要使用高毒性溶剂。操作简便、自动化程度高、分离效果好，固定相所用填料一次装柱、多次使用。
一种长春碱生物碱分离纯化方法

[发明专利]提高长春花细胞中长春碱含量的方法-CN201811230745.1在审
发明人：覃家日 -专利权人：覃家日
申请日： 2018-10-22 - 公布日： 2019-03-12 - 主分类号： A01H4/00 文献下载
摘要：本发明提供一种提高长春花细胞中长春碱含量的方法，其包括以下步骤：1)培育长春花愈伤组织；2)培育稳定遗传的长春花细胞系；3)将步骤2)获得的长春花细胞系接种到液体悬浮培养基中进行诱导培养，以刺激长春花中生物碱的积累，所述诱导条件为：长春花细胞系在液体悬浮培养基培养第10‑15天开始，通入一氧化碳气体以及往液体悬浮培养基中添加尼克酸、蜕皮激素和硫代硫酸银，交替的使用蓝色LED灯和红色LED灯进行光照培养，蓝色LED灯的光强为500‑800lx，光照时间为7‑11h/day，红色LED灯的光强为1000‑1500lx，光照时间为11‑17h/day，直至该培养结束，获得高长春碱含量的长春花细胞。本发明具有培养周期短、长春碱累积含量高等特点。
长春花长春碱液体悬浮培养基长春花细胞红色LED灯蓝色LED灯光强光照一氧化碳气体硫代硫酸银细胞系接种光照培养培养周期蜕皮激素稳定遗传诱导培养诱导条件愈伤组织交替的尼克酸生物碱培育刺激积累

[发明专利]用转录因子提高长春花毛状根萜类吲哚生物碱含量的方法-CN200610023234.3无效
发明人：唐克轩;龚一富;廖志华;苗志奇;孙小芬 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2006-01-12 - 公布日： 2006-07-26 - 主分类号： C12N15/29 文献下载
摘要：本发明是一种生物技术领域的用转录因子提高长春花毛状根萜类吲哚生物碱含量的方法。本发明从长春花中克隆str和g10h基因，构建含str和g10h基因的植物表达载体，遗传转化长春花获得转基因长春花毛状根，液相色谱法测定长春花毛状根中生物碱含量，荧光定量PCR测定长春花毛状根生物碱生物合成相关基因的表达本发明获得的转基因长春花毛状根中重要生物碱的含量显著提高，其中长春碱含量比非转化对照根提高了234倍，从而提供了一种提高长春花毛状根生物碱的方法，也为生产具重要临床需求的抗癌药物长春碱和长春新碱提供了一种新方法
转录因子提高长春花毛状根萜类吲哚生物碱含量方法

[发明专利]一种长春碱衍生物的制备方法-CN201611034734.7有效
发明人：丰贵鹏;贾若凌;杨玉萍;章艳玲;苏天鹅;马国扬 -专利权人：新乡学院
申请日： 2016-11-09 - 公布日： 2017-12-19 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：本发明涉及一种长春碱衍生物的制备方法，包括在硫酸铁和过氧甲酸作用下，式A化合物与文朵灵进行耦合，接着加入还原剂进行还原反应，制得去甲去氢长春碱。本发明不仅收率高，而且所得的产品，纯度非常好。
一种长春碱衍生物制备方法

[发明专利]一种硫酸长春碱的纯化方法-CN201710958580.9有效
发明人：邓团飞;朱义波;郑忠旺;王亚峰 -专利权人：广州普星药业有限公司
申请日： 2017-10-16 - 公布日： 2020-10-27 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种硫酸长春碱的纯化方法，包括甲酰化步骤、重结晶步骤、酸化成盐步骤和甲醇打浆步骤。本发明的纯化方法操作简单，无需过柱，就能获得纯度大于98％的硫酸长春碱，同时，收率能达到35％‑50％，大大降低了生产成本，具有很高的经济价值。
一种硫酸长春碱纯化方法

[发明专利]一种连续中压柱层析制备高纯度硫酸长春碱的方法-CN200510010174.7无效
发明人：祖元刚;杨磊;祖柏实;罗猛;付玉杰;李庆勇;张玉红;肖长文 -专利权人：东北林业大学;祖元刚
申请日： 2005-07-12 - 公布日： 2006-01-25 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：一种连续中压柱层析制备高纯度硫酸长春碱的方法，将硫酸长春碱粗品用去离子水溶解，加入氨水调节pH碱性，用含氯溶剂萃取，分离有机相，有机相干燥后回收溶剂至干，得上柱样品。使用中压氧化铝填充柱，湿法装柱，流动相溶样，烃溶剂和含氯溶剂的混合液为洗脱剂，柱塞式溶剂泵进液，收集含长春碱流分，回收洗脱剂后的浓缩物乙醇溶解，加硫酸酸化，析出沉淀，沉淀用95％乙醇重结晶，结晶产物冷冻干燥，可获得纯度98％以上的硫酸长春碱纯品。
一种连续中压柱层析制备纯度硫酸长春碱方法

[发明专利]一种从长春花中提取长春碱的方法-CN200810131031.5无效
发明人：董志超;何际婵;王建荣;邹冬梅;晏小霞;庞玉新;王祝年 -专利权人：中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所
申请日： 2008-08-12 - 公布日： 2009-01-07 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种从长春花中提取长春碱的方法，它是将长春花鲜品加入含盐的酸性提取溶液制成匀浆，经超声波处理后采用沉降离心机进行固液分离，提取液经调pH值至碱性、有机溶剂萃取，萃取液再经浓缩、纯化后得到长春碱成品
一种长春花提取长春碱方法

[发明专利]一种酒石酸长春瑞滨的制备工艺-CN202210090234.4有效
发明人：付光明 -专利权人：湖北宏中药业股份有限公司
申请日： 2022-01-25 - 公布日： 2022-12-16 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：本发明属于医药化学领域，具体涉及一种酒石酸长春瑞滨的制备工艺，包括阳离子二聚体的合成、脱水长春碱的合成、7’‑溴代脱水长春碱的合成、长春瑞滨粗品的合成、氧化铝脱色和长春瑞滨游离碱结晶等步骤，本发明通过一系列条件控制减少了反应的副反应、降低了17‑溴代长春瑞滨、RRT0.72等杂质的含量，并使硼氢化钠反应当量大幅减少，同时无需柱层析、仅通过结晶即可得到高纯度药用级的酒石酸长春瑞滨，生产成本低、生产周期短，易于实现工业化生产。
一种酒石酸长春制备工艺

[发明专利]新的长春碱衍生物、其制备方法和用途、以及包含该衍生物的药物组合物-CN200710036923.2无效
发明人：胡立宏;沈旭;蒋华良;楼丽广;丁宏;邵勇;章涵堃 -专利权人：中国科学院上海药物研究所
申请日： 2007-01-29 - 公布日： 2008-08-06 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：本发明提供了一类具有右式1所示结构的长春碱衍生物或其生理上可接受的盐、其制备方法和用途，以及包括该衍生物的药物组合物。所述长春碱衍生物对肿瘤细胞株具有抑制活性，可用作治疗恶性肿瘤的药物。
长春碱衍生物制备方法用途以及包含药物组合

[发明专利]一种长春花生物碱类活性成分的诱导提取方法-CN201010505108.8无效
发明人：祖元刚;罗猛;牟璠松;付玉杰;唐中华;李庆勇;郭晓瑞;张宝友 -专利权人：东北林业大学;祖元刚
申请日： 2010-10-13 - 公布日： 2011-04-20 - 主分类号： A61K36/24 文献下载
摘要：本发明涉及中草药长春花活性成分的提取技术，目的在于提供一种经济快速的获得富含长春碱、长春新碱、长春质碱和文多灵四种生物碱类活性成分的长春花提取物的高效酶诱导提取方法。本发明针对传统提取方法提取时间长、提取温度高、提取率低等缺点，采用匀浆酶诱导提取、负压空化提取、溶剂除杂和富集精制等技术，获得富含四种生物碱类活性成分的长春花提取物，结果表明：提取物中文多灵、长春质碱、长春碱和长春新碱四种生物碱类活性成分的含量分别可达到11.30～17.56％，6.52～10.79％，3.10～5.86％，0.98～1.72％，比传统方法提高了10～80％。
一种长春花生物碱活性成分诱导提取方法

[发明专利]从长春花中提取长春碱类提取物的方法-CN200710187811.7无效
发明人：刘全胜 -专利权人：刘全胜
申请日： 2007-11-13 - 公布日： 2008-04-09 - 主分类号： C07D519/04 文献下载
摘要：一种从长春花中提取长春碱类提取物的方法，包括如下过程：(1)长春花经酸性水拌湿后搅碎，然后用酸性水浸泡，过滤后滤液用碱调节至碱性，用氯仿萃取碱水相，收集氯仿相，回收氯仿后得固体回收物；(2)回收物用酸性水溶解，加乙酸乙酯萃取，回收酸性水相；(3)将步骤(2)中回收的酸性水相调节至碱性，用氯仿萃取，萃取相回收氯仿得粗制生物碱；(4)将步骤(3)中获得的粗制生物碱用酸性水溶解，调pH至碱性，离心收集下层沉淀，沉淀物经干燥后得精制长春花生碱，经氧化铝柱层析分离得长春碱、长春新碱；(5)将步骤(4)中离心所得滤液，用氯仿萃取，减压浓缩，以大孔树脂分离得长春质碱、文朵灵。这种方法可以提高长春花的利用率。
长春花提取长春碱提取物方法

[发明专利]用于使长春碱增量的长春花的处理方法-CN201980045834.5有效
发明人：大桥敬子;藤川康夫;鹤本智大 -专利权人：学校法人玉川学园;日亚化学工业株式会社
申请日： 2019-07-10 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： A01G7/04 文献下载
摘要：本发明提供能够使长春花中的长春碱量有效地/高效地增加的方法。本发明提供一种长春花的处理方法，其特征在于，以对于使该长春花中的长春碱增量而有效的量向长春花整体或至少包含叶部的部分照射370nm以上且400nm以下的波长区域的光，另一方面，使在该照射期间向该长春花照射的
用于长春碱增量长春花处理方法

[发明专利]一种长春花CrWRKY7蛋白多肽的制备及应用-CN202310961325.5在审
发明人：潘琪芳;曾思瑀;潘元炳;唐克轩 -专利权人：上海交通大学
申请日： 2023-08-01 - 公布日： 2023-10-27 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明公开了一种长春花CrWRKY7蛋白多肽的制备及应用，涉及生物技术领域，其制备方法为将CrWRKY7蛋白编码序列通过可操作地方法连于表达调控序列，从而形成长春花CrWRKY7表达载体；长春花CrWRKY7蛋白多肽在调控TIAs合成的应用；过表达CrWRY7蛋白多肽提高长春花中TIAs含量的检测方法，通过双荧光素酶实验检测其直接激活关键酶基因的启动子、通过酵母单杂交实验检测其与启动子结合、检测过表达CrWRY7蛋白多肽是否提高长春花中TIAs含量。本发明制备的长春花CrWRKY7蛋白多肽显著提高脱水长春碱在长春花中合成积累，为通过转录因子提高长春碱等重要生物碱的产量提供了调控方式。
一种长春花 crwrky7 蛋白多肽制备应用