本发明公开了一种对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶，它是由氨基酸序列为SEQ ID NO.1的来源于米曲霉的α‑淀粉酶中制造多个氨基酸取代而产生的、对胃蛋白酶抗性更强的酶，所述的氨基酸取代是第221和375本发明通过蛋白质工程技术对野生型α‑淀粉酶分子内的关键氨基酸残基进行了改造，提供了一种获得对胃蛋白酶抗性提高的α‑淀粉酶突变体，该酶对胃蛋白酶的抗性半衰期比野生型提高了2.54倍。突变型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性是野生型α‑淀粉酶的胃蛋白酶抗性的1.42倍。突变型α‑淀粉酶的其他酶学性质与野生型α‑淀粉酶基本一致。
本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及具有高比活及热稳定性的淀粉酶突变体及其基因和应用。通过将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的野生型淀粉酶进行S33A/S34E/V35H点突变，并去除178和179位氨基酸，从而获得所述淀粉酶突变体。本发明的淀粉酶突变体与野生型淀粉酶相比，具有如下性状：1)淀粉酶酶活性增强；2)淀粉酶热稳定性增强。
本发明公开了热稳定性提高的低温淀粉酶突变体及其应用。本发明将低温淀粉酶进行定点突变最终筛选得到了热稳定性显著提高的3个低温淀粉酶突变体，其氨基酸序列分别为SEQ ID No.3、SEQ ID No.4或SEQ ID No.5所示；Tm值测定结果表明三个突变体的Tm值均比野生型淀粉酶有明显提升，其中SEQ ID No.5所示突变体的Tm值相比野生型提高了4.77℃；残余酶活力比较试验结果发现，三个突变体的残余酶活力相比野生型淀粉酶分别提高了1.6倍，2.4倍和2.6倍；酶动力学参数测定结果表明，本发明低温淀粉酶突变体不仅可显著提高淀粉酶的热稳定性还可有效提高淀粉酶的催化效率。
本发明属于生物技术领域，具体涉及淀粉酶突变体ZDAMYA及其编码基因和应用。本发明的淀粉酶突变体ZDAMYA，其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明提供的突变酶酶活力由比野生型提高53％；突变后催化效率较野生型相比提高了1.52倍。因此，本发明提供的淀粉酶突变体能很好的满足食品、医药、饲料以及纺织工业等领域中应用的需求，具有广阔的应用前景。
本发明属于农业生物技术领域，具体涉及具有高耐热性的α‑淀粉酶突变体K152H/A166C/E168H及其基因和应用。通过将氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的野生型α‑淀粉酶进行K152H/A166C/E168H点突变，获得所述α‑淀粉酶突变体。本发明提供的突变酶的最适作用温度由野生型的85‑90℃提高到了95‑100℃，热稳定性大幅提高，能很好的满足能源、食品和饲料等领域中应用的对于高温下α‑淀粉酶水解活性的需求，有着非常广阔的应用前景。
