“重组质粒转染”专利关键词查询_检索下载_查询列表_检索列表_行业专利分布_钻瓜专利网

钻瓜专利网为您找到相关结果74715个，建议您升级VIP下载更多相关专利

[发明专利]一种人抗体基因重组质粒的转染方法-CN201610701207.0有效
发明人：魏强;胡萍;辛洪波;刘苏俊;殷文曲 -专利权人：南昌大学
申请日： 2016-08-22 - 公布日： 2019-12-20 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：一种抗体基因重组质粒的转染方法，是采用脂质体转染方法，将Lipofectamine3000作为转染试剂，HEK293细胞作为转染的宿主细胞，边传代边转染，将人抗体重链基因重组质粒和人抗体轻链基因重组质粒体外瞬时共转染至HEK293细胞，培养48h后，检测细胞培养上清IgG分泌量，从而将人抗体基因重组质粒成功转染至HEK293细胞。本发明所述转染方法操作简便，安全，重复性好，可自然降解，低细胞毒性，快速，高效，经济，适应性广等优点。
转染重组质粒细胞培养人抗体轻链基因人抗体重链基因传代低细胞毒性人抗体基因脂质体转染抗体基因宿主细胞转染试剂自然降解共转染体外分泌检测安全成功

[发明专利]体外检测MUSK-Ab和LRP4-Ab的方法及试剂盒-CN201810989134.9有效
发明人：高峰;韩姣姣;李明强;张迎娜;张婧;赵雪;吕杰;方华 -专利权人：河南省医药科学研究院
申请日： 2018-08-28 - 公布日： 2021-11-19 - 主分类号： G01N21/64 文献下载
摘要：该方法包括以下步骤：取293T细胞，将293T细胞转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒和/或pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒；向转染pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或转染pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞添加多聚甲醛后固定15～30min；磷酸盐缓冲液洗涤之后添加牛血清白蛋白和TritonX‑100进行封闭、通透2～3h；取待测血清，添加封闭、通透后的pCMV6‑AC‑GFP‑MuSK重组质粒的转染细胞和/或封闭、通透的pCMV6‑AC‑GFP‑LRP4重组质粒的转染细胞中，24～28℃下孵育45min～2h，磷酸盐缓冲液洗涤之后加入Alexa
体外检测 musk ab lrp4 方法试剂盒

[发明专利]CHO细胞的瞬时转染方法及重组CHO细胞-CN201910680232.9在审
发明人：梁千惠 -专利权人：佛山汉腾生物科技有限公司;广州汉腾生物科技有限公司
申请日： 2019-07-26 - 公布日： 2019-12-10 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及一种CHO细胞的瞬时转染方法及重组CHO细胞。该瞬时转染方法包括如下步骤：以细胞密度、转染试剂的添加量、含目的基因的质粒的添加量为因素，以目的基因的表达量和转染效率为响应变量，进行三因子九水平的均匀设计，获得瞬时转染工艺参数；根据瞬时转染工艺参数，以质粒的添加量和转染试剂的添加量为因素，以目的基因的表达量和转染效率为响应变量，进行二因子的正交设计，获得包含CHO细胞悬液的细胞密度、转染试剂的添加量以及质粒的添加量的瞬时转染条件；及根据瞬时转染条件，向CHO细胞悬液中加入转染试剂和质粒进行瞬时转染，培养，得到重组CHO细胞。上述瞬时转染方法兼具较高转染效率和较高目的基因表达量。
瞬时转染添加量目的基因转染试剂质粒转染效率表达量重组CHO细胞悬液细胞均匀设计正交设计响应

[发明专利]一种利用sf9悬浮昆虫细胞高效率获得重组杆状病毒的方法-CN201810479895.X在审
发明人：张恒;朱海燕;赵泽升;李朝阳;宋桂才;薛希娟 -专利权人：山东信得动物疫苗有限公司
申请日： 2018-05-18 - 公布日： 2018-10-12 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：本发明公开了一种利用sf9悬浮昆虫细胞高效率获得重组杆状病毒的方法，包括以下步骤：（1）健康悬浮sf9昆虫细胞作为转染受体细胞，铺设6孔板；（2）采用无内毒素质粒提取试剂盒，提取重组转移载体质粒；（3）采用qBac‑IIIG杆粒和重转移载体P1064质粒体系进行重组杆状病毒拯救载体；（4）采用Sinofection转染试剂辅助将qBac‑IIIG杆粒和重组转移载体P1064转入健康悬浮sf9昆虫细胞中，获得重组杆状病毒。本发明利用sf9悬浮昆虫细胞高效率获得重组杆状病毒方法的建立，具有以下有益效果：可利用悬浮SF9昆虫细胞进行转染，转染效率高，通过荧光显微镜早期可以直接判断转染是否成功及转染效率，为疫苗行业高效获得重组杆状病毒表达疫苗抗原工作打下了工作基础
重组杆状病毒悬浮昆虫细胞高效率转染重组转移载体转染效率杆粒质粒重组杆状病毒表达内毒素质粒提取试剂盒荧光显微镜工作基础受体细胞疫苗抗原转染试剂转移载体疫苗铺设转入健康成功

[发明专利]曼氏无针乌贼神经肽Y及其重组表达方法和应用-CN201810681630.8在审
发明人：杨静文;王天明;宋伊敏;梁晶;陈旭;吕振明 -专利权人：浙江海洋大学
申请日： 2018-06-27 - 公布日： 2018-12-18 - 主分类号： C07K14/435 文献下载
摘要：本发明公开了一种曼氏无针乌贼神经肽Y及其重组表达方法和应用。该方法包括：(1)获得表达曼氏无针乌贼神经肽Y的重组基因，重组基因包括自5’端至3’端依次排列的分泌信号肽基因序列、神经肽Y基因序列及酶切修饰肽段基因序列；(2)将重组基因插入到骨架质粒中，获得重组质粒；(3)将重组质粒转染至宿主细胞中，获得转染细胞；(4)培养转染细胞，收集转染细胞培养液，获得曼氏无针乌贼神经肽Y。本申请首次将曼氏无针乌贼神经肽Y进行重组表达，实现曼氏无针乌贼神经肽Y的胞外分泌表达，并进而将重组表达的神经肽Y投喂或皮下注射给曼氏无针乌贼，显著提高了曼氏无针乌贼的摄食率，显著促进了曼氏无针乌贼的生长发育
曼氏无针乌贼神经肽Y 重组表达基因序列重组基因转染细胞培养液重组质粒转染分泌信号肽胞外分泌骨架质粒皮下注射生长发育宿主细胞依次排列重组质粒摄食率修饰肽酶切投喂应用申请

[发明专利]受磷蛋白基因反义RNA重组AAV载体、病毒、构建方法及应用-CN201810004671.3在审
发明人：李江;胡申江 -专利权人：李江
申请日： 2018-01-03 - 公布日： 2018-06-22 - 主分类号： C12N15/864 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体涉及一种受磷蛋白基因反义RNA重组AAV载体、病毒、构建方法及应用。所述受磷蛋白基因反义RNA重组AAV载体是分别将如SEQ ID NO.1所示的PLB基因片段和腺相关病毒骨架质粒pAAV‑MCS分别经EcoRI和BamHI双酶切后，将PLB基因片段和腺相关病毒骨架质粒所述重组腺相关病毒由受磷蛋白基因反义RNA重组AAV载体和辅助质粒共转染工程细胞后包装而成。本发明制备的重组腺相关病毒载体克服了非病毒载体的低转染效率，制备的rAAV‑asPLB也克服了重组腺病毒的免疫原性、表达时间短等缺点，具有高转染效率、安全和持久表达等优势。
受磷蛋白基因重组AAV载体反义RNA 腺相关病毒骨架质粒基因片段转染效率构建制备重组腺相关病毒载体重组腺相关病毒生物技术领域病毒非病毒载体重组腺病毒辅助质粒工程细胞酶切产物免疫原性共转染双酶切应用安全

[发明专利]一种鸭ACE2基因真核表达质粒的构建方法以及在CHO稳定细胞系构建中的应用-CN202010727641.2在审
发明人：张源淑;李帅;王换换;叶平生;付亚丽;谢娜娜 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2020-07-24 - 公布日： 2022-01-25 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明涉及可以表达外源鸭ACE2的重组质粒pcDNA3.1‑ACE2的构建以及鉴定，以及CHO细胞G418压力筛选浓度的确定，通过稳定转染将该重组质粒转染进CHO内，在G418压力筛选下，借助免疫荧光及Western‑blot技术构建了可以表达外源ACE2蛋白的重组CHO细胞系。
一种 ace2 基因表达质粒构建方法以及 cho 稳定细胞系中的应用

[发明专利]用于人体细胞重编程的重组仙台病毒的制备方法及其应用-CN201910393050.3有效
发明人：不公告发明人 -专利权人：深圳市瑞亚再生医学科技有限责任公司
申请日： 2019-05-13 - 公布日： 2021-05-11 - 主分类号： C12N15/86 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于人体细胞重编程的重组仙台病毒的制备方法，包括：制备含有T7终止子、P基因、L基因、NP基因和IRES片段的三种辅助质粒，和含有T7启动子、锤头状酶序列、乙肝核酶序列、T7终止子的pUC57‑Simple质粒；将所述pUC57‑Simple质粒酶切后连接full‑2质粒酶切产物，得到仙台病毒主骨架质粒；提供BSR‑T7/5细胞，使用DMEM无血清完全培养基培养；转染前换液为Opti‑MEM培养基，并加入所述病毒辅助质粒T7‑IRES‑P/L/NP和所述仙台病毒主骨架质粒；在lipo3000中添加聚乙烯亚胺作为转染试剂进行转染；将转染后的细胞体进行增殖培养，收集重组仙台病毒。
用于人体细胞编程重组仙台病毒制备方法及其应用

[发明专利]一种AFP与HBsAg双抗原基因修饰的DC联合CIK免疫细胞及其制备方法和应用-CN201810892943.8在审
发明人：胡钦勇 -专利权人：武汉大学人民医院（湖北省人民医院)
申请日： 2018-08-07 - 公布日： 2018-12-21 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：所述制备方法为：首先构建pHAGE‑AFP‑HBsAg重组质粒，然后将重组质粒pHAGE‑AFP‑HBsAg、辅助质粒psPAX2和pMD2G用磷酸钙转染试剂共转染293T细胞，获得AFP‑HBsAg重组慢病毒；随后用AFP‑HBsAg重组慢病毒感染DC细胞获得AFP‑HBsAg修饰的DC细胞，最后将AFP‑HBsAg修饰的DC细胞与CIK细胞的联合培养，得到DC‑CIK免疫细胞。
修饰免疫细胞制备方法和应用重组慢病毒抗原基因重组质粒生物技术领域辅助质粒联合培养转染试剂共转染磷酸钙构建制备联合细胞感染

[发明专利]一种标记及追踪CD133阳性室管膜细胞的重组质粒、构建方法及鉴定方法-CN202110901887.1在审
发明人：孙臣友;周鹏;廖敏;崔怀瑞;李军伟;韦玉兵;谢明琦;李梦一;边维;王彤彤;叶鑫;陈治池;张鹏 -专利权人：温州医科大学
申请日： 2021-08-06 - 公布日： 2021-11-26 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明属于生物工程领域，具体涉及一种标记及追踪CD133阳性室管膜细胞的重组质粒、构建方法及鉴定方法。所述重组质粒是以质粒pCAG‑cre为载体，在质粒pCAG‑cre限制性酶切位点SpeI和EcoRI之间插入CD133‑promoter2基因得到的CD133‑promoter2‑Cre重组质粒，所述CD133当本发明提供的重组质粒在活体内成功电转染到ROSA26‑LacZ小鼠的CD133阳性室管膜细胞中，通过β‑gal免疫荧光染色可以检测到转染成功的CD133阳性的室管膜细胞和它们的子代细胞，从而可以观察到
一种标记追踪 cd133 阳性室管膜细胞重组质粒构建方法鉴定

[发明专利]一种β2-GP1改构蛋白及其构建方法、应用-CN202011057053.9在审
发明人：秦枫;姚俊腾;季纯宇;任伟超;张小飞;颜松;周玥;黄敬双;张伟;万文琴;鲜静 -专利权人：四川携光生物技术有限公司
申请日： 2020-09-30 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C07K14/775 文献下载
摘要：本发明公开了β2‑GP1改构蛋白及其构建方法、应用，构建方法包括以下步骤：S1、重组全基因合成序列：依次连接结构域1、结构域4、结构域5蛋白区段的核苷酸序列获得目的基因；S2、构建重组质粒：将步骤S1中获得的重组全基因合成序列构建至表达载体，获得重组质粒；S3、一次转染：将步骤S2中的重组质粒转染宿主细胞，获得重组杆粒；S4、二次转染：将步骤S3中的重组杆粒再次转染宿主细胞，获得第一代的杆状病毒；S5、表达：将步骤S4中的第一代的杆状病毒进行表达
一种 gp1 蛋白及其构建方法应用

[发明专利]FTCD和CYP2D6融合蛋白及其构建方法、应用-CN202011057065.1在审
发明人：秦枫;李昕蔓;万文琴;刘萍;张小飞;颜松;周玥;黄敬双;张伟;任伟超;吴斌 -专利权人：四川携光生物技术有限公司
申请日： 2020-09-30 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了FTCD和CYP2D6融合蛋白及其构建方法、应用，构建方法包括以下步骤：S1、重组全基因合成序列：连接FTCD和CYP2D6蛋白区段的核苷酸序列获得目的基因；S2、构建重组质粒：将步骤S1中获得的重组全基因合成序列构建至表达载体，获得重组质粒；S3、一次转染：将步骤S2中的重组质粒转染宿主细胞，获得重组杆粒；S4、二次转染：将步骤S3中的重组杆粒再次转染宿主细胞，获得第一代的杆状病毒；S5、表达：将步骤S4中的第一代的杆状病毒进行表达
ftcd cyp2d6 融合蛋白及其构建方法应用

[发明专利]PR3、MPO、GBM融合蛋白及其构建方法、应用-CN202011057082.5在审
发明人：秦枫;李娜;张朋飞;任伟超;张小飞;颜松;周玥;黄敬双;张伟;鲜静;吴斌 -专利权人：四川携光生物技术有限公司
申请日： 2020-09-30 - 公布日： 2021-01-22 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了PR3、MPO、GBM融合蛋白及其构建方法、应用，构建方法包括以下步骤：S1、重组全基因合成序列：依次连接PR3、MPO、GBM蛋白区段的核苷酸序列获得目的基因；S2、构建重组质粒：将步骤S1中获得的重组全基因合成序列构建至表达载体，获得重组质粒；S3、一次转染：将步骤S2中的重组质粒转染宿主细胞，获得重组杆粒；S4、二次转染：将步骤S3中的重组杆粒再次转染宿主细胞，获得第一代的杆状病毒；S5
pr3 mpo gbm 融合蛋白及其构建方法应用

[发明专利]检测沉默GPC-3基因转录抑制肝癌裸鼠移植瘤能力的方法-CN201310601573.5在审
发明人：姚登福;陈洁;姚敏;王理 -专利权人：南通大学附属医院
申请日： 2013-11-25 - 公布日： 2014-04-23 - 主分类号： G01N33/574 文献下载
摘要：通过1）针对靶基因共有序列设计并合成4对miRNA寡聚单链DNA,再合成相应dsDNA，将dsDNA插入载体构建4种重组质粒，并通过荧光定量PCR挑选出干扰效率最高的一种重组质粒；2）将上述干扰效率最高的重组质粒转染至HepG2细胞中构建转染HepG2细胞，并对其进行筛选，得到稳定转染HepG2细胞;3）将上述稳定转染HepG2细胞接种裸鼠皮下构建人肝癌细胞荷瘤裸鼠模型；4）而后测定上述稳定转染HepG2细胞在人肝癌细胞荷瘤裸鼠模型中生长情况
检测沉默 gpc 基因转录抑制肝癌移植能力方法

[发明专利]一种重组沃氏菌的天门冬酰胺酶的制备法-CN201110178452.5无效
发明人：范铭琦 -专利权人：范铭琦
申请日： 2011-06-29 - 公布日： 2013-01-02 - 主分类号： C12N15/55 文献下载
摘要：本发明涉及生物医药的基因重组领域，具体地说是一种重组沃氏菌的天门冬酰胺酶的制备法；其特征在于包括以下步骤：采用PCR技术从沃氏菌的基因组DNA中扩增出天门冬酰胺酶的全长或部分片段的DNA，将上述DNA用DNA连接酶连接到克隆质粒中，从克隆质粒中切割出天门冬酰胺酶的全长或部分片段的DNA，再连接到原核细胞表达质粒中，表达质粒转染到大肠杆菌中，在抗生素选择培养基中培养此转染的细菌以扩增含有天门冬酰胺酶的全长或部分片段的DNA的表达质粒，收集转染的菌体，离心分离出菌体；破碎细菌，释放重组天门冬酰胺酶；用二步柱层析法分离精制重组沃氏菌天门冬酰胺酶；本发明具有工艺步骤少，可控制质量且大量制备的优点。
一种重组沃氏菌天门冬酰胺酶制备

1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
下一页»
尾页
共 74715 条