本发明公开了一种新的重组赤羽病毒核衣壳蛋白、编码该重组蛋白基因以及该重组蛋白的制备方法。本发明重组蛋白具有SEQ ID No:1所示的氨基酸序列,编码该重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因具有SEQ ID No:2所示的核苷酸序列。本发明重组蛋白的制备方法包括以下步骤:构建重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因原核表达载体;用重组赤羽病毒核衣壳蛋白基因原核表达载体转化大肠杆菌;用IPTG诱导重组核衣壳蛋白表达,回收并纯化所表达的重组核衣壳蛋白本发明重组赤羽病毒核衣壳蛋白能够在大肠杆菌中高效表达,所表达的重组蛋白具有高免疫学活性和高敏感性,利用该重组赤羽病毒核衣壳蛋白制备成的抗血清,采用间接荧光抗体法可以快速、准确的检测出组织中的赤羽病毒抗原
本发明首先设计了一对可特异性扩增甲鱼虹彩病毒核衣壳蛋白全基因的引物,其具有如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。用其扩增出的甲鱼虹彩病毒核衣壳蛋白全基因,具有如SEQID NO.3所示的核苷酸序列。然后摸索出合适的PCR反应体系与反应条件,构建并筛选含有甲鱼虹彩病毒核衣壳蛋白全基因序列的重组质粒pGEM-T-S。其可作为标准阳性参考物质用于甲鱼虹彩病毒核衣壳蛋白基因(STIV MCP)、流行性造血器官坏死病毒核衣壳蛋白基因(EHNV MCP)或虎纹蛙虹彩病毒核衣壳蛋白基因(TFV MCP)的分子生物学检测
本发明公开了一种基因4型猪戊型肝炎病毒结构区衣壳蛋白基因及其在制备猪戊型肝炎病毒样颗粒中的用途。本发明的经改造后的基因4型猪戊型肝炎病毒结构区衣壳蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,本发明同时公开了该基因表达的重组蛋白及制备病毒样颗粒的方法,具体涉及基因4型猪戊型肝炎病毒结构区衣壳蛋白基因的改造、基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达,以及重组蛋白形成病毒样颗粒的制备和扩大培养条件等操作方法的改进等步骤。本发明简单易行,成本较低,实现了基因4型猪戊型肝炎病毒结构区衣壳蛋白在毕赤酵母中稳定分泌表达,表达的重组衣壳蛋白可自包装形成病毒样颗粒,为猪戊型肝炎病毒的抗体检测及亚单位疫苗的研制提供了基础。
本发明公开了一种腺相关病毒衣壳蛋白基因、相应的蛋白及其应用。本发明腺相关病毒衣壳蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示,其编码的蛋白质的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明腺相关病毒衣壳蛋白所包装的腺相关病毒载体可以有效地将外源基因导入体外培养的细胞中或导入体内,用于制备基因治疗或基因疫苗相关的药物。
描述了具有与SEQ ID NO:3的序列具有至少98%同一性或与SEQ ID NO:4的序列至少94%同一性的氨基酸序列的AAV衣壳蛋白。还描述了一种药物组合物,包含该衣壳蛋白的AAV衣壳和病毒颗粒,包含编码该衣壳蛋白的核苷酸序列的重组AAV载体和包含该衣壳蛋白或该载体的宿主细胞和转基因动物。另外,还描述了将目的核酸转移到哺乳动物中的方法,其包括将重组AAV载体导入哺乳动物,其中该重组AAV载体包含被包裹到包含该衣壳蛋白的衣壳中的目的基因。